Question

【題目】科學(xué)家利用生物工程培育出轉(zhuǎn)基因綠色熒光鼠，回答以下相關(guān)問題：

（1）綠色熒光基因可從cDNA文庫(kù)中獲取，應(yīng)用之前需要在基因首端加入_______，它是_______酶的結(jié)合位點(diǎn)。

（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，常用的運(yùn)載體有__________。一般將重組DNA導(dǎo)入小鼠的____________細(xì)胞。

（3）目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，要檢測(cè)目的基因是否表達(dá)，常用的檢測(cè)方法有_____________和___________。

（4）生物體對(duì)于外來(lái)器官或細(xì)胞具有________反應(yīng)，原因是對(duì)于機(jī)體，外來(lái)移植物是_______________，此過(guò)程中有識(shí)別作用但無(wú)特異性識(shí)別功能的免疫細(xì)胞是___________。但在胚胎移植過(guò)程中，受體小鼠對(duì)移入子宮的早期胚胎基本上不發(fā)生此種情況，原因是對(duì)受體小鼠已采取_________處理。

Answer 1

【答案】啟動(dòng)子 RNA聚合酶 質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒、λ噬菌體的衍生物 受精卵 DNA分子雜交 抗原抗體特異性反應(yīng) 免疫排斥 抗原 吞噬細(xì)胞 同期發(fā)情

【解析】

目的基因的檢測(cè)與鑒定，基因探針--用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段。1．分子水平上的檢測(cè)①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。2．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程中常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒和λ噬菌體的衍生物。由于受精卵具有全能性，為最理想的受體細(xì)胞。

（3）目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可以用DNA分子與mRNA分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可以用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測(cè)。

（4）生物體對(duì)于外來(lái)器官或細(xì)胞是外來(lái)的，在免疫系統(tǒng)中作為抗原，機(jī)體對(duì)其具有免疫排斥反應(yīng)，此過(guò)程中有識(shí)別作用但無(wú)特異性識(shí)別功能的免疫細(xì)胞是第二道防線中的吞噬細(xì)胞，原因是對(duì)受體小鼠已采取同期發(fā)情處理，因此在胚胎移植過(guò)程中，受體小鼠對(duì)移入子宮的早期胚胎基本上不發(fā)生此種情況。