【題目】為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。

（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用 技術(shù)從陸地棉基因文庫(kù)中獲取酶

D基因，從擬南芥基因文庫(kù)中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因，所含三種限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切

點(diǎn)如下圖所示。則用 和 酶處理兩個(gè)基因后，可得到 端與

端（填圖中字母）相連的融合基因。

（2）將上述融合基因插入右上圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建 并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含 的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。

（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過(guò)程的目的是 。

（4）進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞，該細(xì)胞通過(guò) 技術(shù)，可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株。用 法在分子水平上可檢測(cè)轉(zhuǎn)基因油菜植株中的融合基因是否成功表達(dá)。

【答案】（1）PCR ClaⅠ DNA連接 A D

（2）基因表達(dá)載體（或“重組質(zhì)粒”） 四環(huán)素

（3）利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞 植物組織培養(yǎng)

（4）抗原—抗體雜交

【解析】（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用PCR法從陸地棉基因文庫(kù)中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫(kù)中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因．在上述引物設(shè)計(jì)時(shí)，分別在引物中加入如圖甲所示酶的識(shí)別序列，這樣可以用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個(gè)基因后，得到A、D端相連的融合基因．

（2）將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建表達(dá)載體即重組質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中．將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液．

（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過(guò)程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞，進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜．

（4）用抗原-抗體雜交法可檢測(cè)轉(zhuǎn)基因油菜植株中的融合基因是否成功表達(dá)．

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】如下圖所示，請(qǐng)據(jù)圖回答下面的問(wèn)題。

(1)淋巴細(xì)胞能與骨髓瘤細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，兩種細(xì)胞膜也能 “融合”在一起，說(shuō)明細(xì)胞膜[__________________________。此過(guò)程，常用__________________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞的特點(diǎn)是___________________________________________。

(2)雜交瘤細(xì)胞的體外培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比有何主要不同

_____________________________________________________________________。

(3)單克隆抗體注入體內(nèi)后可以自動(dòng)追蹤抗原(病原體或癌變細(xì)胞等)并與之結(jié)合，而絕不攻擊任何正常細(xì)胞，故稱為“生物導(dǎo)彈”，這是利用了______________________________________________。

(4)在單克隆抗體制備過(guò)程中，還應(yīng)用了細(xì)胞工程中的__________________和__________________兩大技術(shù)。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】下列敘述不符合“形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)”生物學(xué)觀點(diǎn)的是

A．根尖成熟區(qū)表皮細(xì)胞具有中央大液泡，有利于水分的吸收

B．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜可與核膜、細(xì)胞膜相連，有利于細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的運(yùn)輸

C．神經(jīng)元的突觸小體內(nèi)含有較多線粒體，有利于神經(jīng)遞質(zhì)的釋放

D．卵細(xì)狍體積較大，有利于提高與周圍環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的效率

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】生物試卷）對(duì)動(dòng)物細(xì)胞某種細(xì)胞器的組成成分進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)它含有A、T、G、C、U5種堿基．主要由該細(xì)胞器完成的生理活動(dòng)是（ ）

A．CO2+H2O→（CH2O）+O2

B．C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量

C．C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量

D．DNA→RNA→蛋白質(zhì)

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】下圖所示以DNA為模板轉(zhuǎn)錄RNA的過(guò)程圖解，圖中4、5表示兩種功能不同的酶。請(qǐng)根據(jù)圖分析回答下面的問(wèn)題：

（1）在玉米的葉肉細(xì)胞，則能夠進(jìn)行該生理過(guò)程的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有___________。

（2）轉(zhuǎn)錄過(guò)程中DNA首先在[ ]__________的催化作用下，由________提供能量，將DNA分子中堿基對(duì)內(nèi)的____________斷開(kāi)，該過(guò)程稱為_(kāi)_______________。

（3）然后在［ ］_________的催化作用下，以其中的________鏈作為信息模板，以［ ］_________為原料，合成出[ ]___________。

（4）通過(guò)轉(zhuǎn)錄，DNA分子中的遺傳信息被準(zhǔn)確地轉(zhuǎn)移到_______________中。

（5）在真核細(xì)胞的細(xì)胞核中，轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物通過(guò)_______進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中，與________結(jié)合在一起直接指導(dǎo)蛋白質(zhì)的生物合成過(guò)程。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果膠使細(xì)胞壁破損。成熟的番茄果實(shí)中，PG合成顯著增加，能使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達(dá),可延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期�？茖W(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上，導(dǎo)入番茄細(xì)胞中，得到轉(zhuǎn)基因番茄，具體操作流程如下圖。據(jù)圖分析并回答下列問(wèn)題：

（1）形成的PG反義質(zhì)粒叫做_______________，它的構(gòu)建過(guò)程是基因工程的核心，需要用到的工具酶有_____________。若已獲取PG的mRNA，可通過(guò)________ 獲取PG基因。

（2）重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到大腸桿菌中的目的是 ，要實(shí)現(xiàn)此目的，還可以用_________法。

（3）要獲取番茄的原生質(zhì)體，通常要用到 酶。用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后，可用含有 的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。將其置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為0．3g/ml的蔗糖溶液中，觀察細(xì)胞的 現(xiàn)象來(lái)鑒別細(xì)胞壁是否再生。

（4）由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA，且能與 （“①天然的PG基因/②天然的PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA”填序號(hào)）互補(bǔ)結(jié)合，因此可抑制PG基因的正常表達(dá)。若觀察到番茄果實(shí)的保質(zhì)期__________，則可確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。

（5）將轉(zhuǎn)入反向鏈接PG基因的番茄細(xì)胞培育成完整的植株，還需要用 技術(shù)；其中，愈傷組織經(jīng)__________形成完整植株。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】人體組織水腫的原因之一可能是（　�。�
A.血漿中無(wú)機(jī)鹽含量少
B.組織液中蛋白質(zhì)含量少
C.血液中尿素含量少
D.營(yíng)養(yǎng)不良

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】

（1）用一定濃度的X溶液處理臨時(shí)裝片A，得到如圖C所示的結(jié)果，據(jù)圖判斷物質(zhì)X進(jìn)入細(xì)胞的方式應(yīng)該為 。

（2）據(jù)圖C推測(cè)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，圖B所示細(xì)胞發(fā)生的形態(tài)變化是 。發(fā)生這些變化的條件為：

①植物細(xì)胞的 相當(dāng)于一層半透膜，② 之間存在濃度差。

（3）為了更好地觀察植物細(xì)胞失水和吸水過(guò)程，通常選擇紫色洋蔥外表皮細(xì)胞作為材料，原因是 。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】下列哪一項(xiàng)不是染色體結(jié)構(gòu)變異

A. 染色體片段顛倒 B. 染色體片段移接

C. 染色體片段的缺失或增加 D. 染色體數(shù)目增加

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