Question

【題目】乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染可導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生�？蒲腥藛T將HPV外殼L1蛋白基因與在人體中不能復(fù)制但能有效表達(dá)外源基因的痘苗病毒重組，制備新型疫苗。

（1）用痘苗病毒感染雞胚細(xì)胞，一段時(shí)間后洗去吸附的病毒，將雞胚細(xì)胞轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基中加入適量抗生素以避免_____________。在培養(yǎng)基中加入L1蛋白基因與質(zhì)粒連接構(gòu)建的重組質(zhì)粒，使L1蛋白基因與_____________在雞胚細(xì)胞內(nèi)發(fā)生DNA重組，得到重組病毒疫苗。依據(jù)L1基因序列設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增重組病毒DNA，以檢測(cè)______________________。

（2）為研究重組疫苗的保護(hù)作用，將生長(zhǎng)發(fā)育狀況一致的小鼠隨機(jī)均分為三組，1組注射用PBS緩沖液配制的重組病毒疫苗100μL，2組注射_____________作為對(duì)照，3組注射_____________作為空白對(duì)照。

（3）給上述三組小鼠皮下注射C3細(xì)胞（含有HPV基因的癌細(xì)胞），觀察、記錄小鼠成瘤情況，結(jié)果如下。

組別	各組平均瘤重（g）
1	0.192
2	0.347
3	0.916

據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，盡管各組小鼠都可成瘤，但實(shí)驗(yàn)組小鼠__________________________，說明重組病毒疫苗具有一定的免疫保護(hù)作用。接種重組病毒疫苗的小鼠體內(nèi)表達(dá)_____________作為抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫。皮下注射C3細(xì)胞時(shí)，HPV引起_____________細(xì)胞迅速增殖、分化，產(chǎn)生大量抗體，從而起到免疫保護(hù)作用。根據(jù)免疫學(xué)知識(shí)，注射疫苗后，只有誘發(fā)出機(jī)體的_____________免疫，才能有效清除癌細(xì)胞。

（4）若欲檢驗(yàn)重組病毒疫苗是否有治療作用，對(duì)小鼠進(jìn)行的處理最恰當(dāng)?shù)氖?/span>_____________（選填下列字母）。

a.先注射HPV病毒，一段時(shí)間后注射重組病毒疫苗

b.先注射重組病毒疫苗，一段時(shí)間后再注射HPV病毒

c.先注射C3細(xì)胞，一段時(shí)間后注射重組病毒疫苗

d.先注射重組病毒疫苗，一段時(shí)間后再注射C3細(xì)胞

Answer 1

【答案】 雜菌污染 痘苗病毒DNA 重組病毒DNA中是否含有L1基因 100μL PBS緩沖液配制的痘苗病毒 100μL PBS緩沖液 平均瘤重較小，成瘤小鼠百分率較低，成瘤時(shí)間較晚 L1蛋白 記憶 細(xì)胞 c

【解析】試題分析：分析表格數(shù)據(jù)可知，組別1注射用PBS緩沖液配制的重組病毒疫苗100μL，平均瘤重最輕；組別2注射100μLPBS緩沖液配制的痘苗病毒，平均瘤重較重；組別3注射100μLPBS緩沖液作為空白對(duì)照，平均瘤重最重。

（1）培養(yǎng)基中加入適量抗生素可以避免雜菌污染。在培養(yǎng)基中加入L1蛋白基因與質(zhì)粒連接構(gòu)建的重組質(zhì)粒，使L1蛋白基因與痘苗病毒DNA在雞胚細(xì)胞內(nèi)發(fā)生DNA重組，得到重組病毒疫苗。依據(jù)Ll基因序列設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增重組病毒DNA，以檢測(cè)重組病毒DNA中是否含有L1基因。
（2）為研究重組疫苗的保護(hù)作用，將生長(zhǎng)發(fā)育狀況一致的小鼠隨機(jī)均分為三組，1組注射用PBS緩沖液配制的重組病毒疫苗100μL，2組注射100μLPBS緩沖液配制的痘苗病毒作為對(duì)照，3組注射100μLPBS緩沖液作為空白對(duì)照。
（3）據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，盡管各組小鼠都可成瘤，但實(shí)驗(yàn)組小鼠平均瘤重較小，成瘤小鼠百分率較低，成瘤時(shí)間較晚，說明重組病毒疫苗具有一定的免疫保護(hù)作用。接種重組病毒疫苗的小鼠體內(nèi)表達(dá)L1蛋白作為抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫。皮下注射C3細(xì)胞時(shí)，HPV引起記憶細(xì)胞迅速增殖、分化，產(chǎn)生大量抗體，從而起到免疫保護(hù)作用。根據(jù)免疫學(xué)知識(shí)，注射疫苗后，只有誘發(fā)出機(jī)體的細(xì)胞免疫，才能有效清除癌細(xì)胞。
（4）若欲檢驗(yàn)重組病毒疫苗是否有治療作用，對(duì)小鼠進(jìn)行的處理最恰當(dāng)?shù)氖?/span>c先注射C3細(xì)胞，一段時(shí)間后注射重組病毒疫苗。