Question

6．紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶O₂和CO₂，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白．請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：
（1）實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固．洗滌紅細(xì)胞時(shí)要用生理鹽水（填溶液）反復(fù)洗滌、離心．要讓紅細(xì)胞破裂，釋放血紅蛋白時(shí)要加入蒸餾水和甲苯．
（2）得到的血紅蛋白溶液裝入透析袋中透析，即血紅蛋白的粗分離，目的是除去去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)．
（3）然后通過(guò)凝膠色譜法（填方法）將樣品進(jìn)一步純化，最后進(jìn)行純度鑒定，使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（填方法）．

Answer 1

分析 血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白．（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析．（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)．（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳．

解答 解：（1）血紅蛋白的提取和分離一般分為4步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定．采取血液時(shí)要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固．樣品處理又包括紅細(xì)胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析4步．洗滌紅細(xì)胞時(shí)要用生理鹽水反復(fù)洗滌、離心．要讓紅細(xì)胞破裂，釋放血紅蛋白時(shí)要加入蒸餾水和甲苯．
（2）透析即是血紅蛋白的粗分離，透析的目的是除去分子量較小的雜蛋白，透析的原理是透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)．
（3）樣品的純化是通過(guò)膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去．使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳．
故答案為：
（1）防止血液凝固  生理鹽水　蒸餾水和甲苯
（2）去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)
（3）凝膠色譜法    SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查血紅蛋白的提取和分離過(guò)程，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作流程的識(shí)記、理解與運(yùn)用．