家蠅幼蟲體內(nèi)有一種抗腫瘤蛋白,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)此蛋白質(zhì)具有抗癌的奇特療效,它能對(duì)腫瘤產(chǎn)生特異性的抑制,并能增強(qiáng)機(jī)體的細(xì)胞免疫和非特異性免疫。英國(guó)皇家醫(yī)學(xué)會(huì)已經(jīng)將此蛋白質(zhì)列為21世紀(jì)首選抗癌藥物。下圖所示為通過基因工程技術(shù)生產(chǎn)這種蛋白質(zhì)的方法,請(qǐng)回答下列問題:

(1)結(jié)構(gòu)A的名稱為____        ,其作用是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,使其在受體細(xì)胞中____       并________   

(2)在進(jìn)行導(dǎo)入過程時(shí),通常用____   處理大腸桿菌細(xì)胞,使其處于           ,然后再將B溶于緩沖液中與受體細(xì)胞混合。

(3)經(jīng)檢測(cè)抗腫瘤基因已經(jīng)成功導(dǎo)入受體細(xì)胞,但并未檢測(cè)出抗腫瘤蛋白mRNA,其原因最可能是基因表達(dá)載體上目的基因首端未加入            。經(jīng)修改后,為檢測(cè)是否翻譯出抗腫瘤蛋白,需從大腸桿菌中提取蛋白質(zhì),用          進(jìn)行分子雜交,若有____         出現(xiàn),表明目的基因已經(jīng)成功表達(dá)。

(4)也可以通過構(gòu)建乳腺生物反應(yīng)器的方法來生產(chǎn)抗腫瘤蛋白,其大致過程為將目的基因與含有____              等調(diào)控組件的載體重組在一起,通過         導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的____      中,體外培養(yǎng)至早期胚胎,經(jīng)過____     的方法,技術(shù)送入母體內(nèi),使其生長(zhǎng)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,最后從該動(dòng)物的____     中提取抗腫瘤蛋白.

 

【答案】

(1)質(zhì)粒    復(fù)制     表達(dá)         (2)Ca2+   感受態(tài)

(3)(適宜的)啟動(dòng)子(其他合理答案可給分)(2分)  相應(yīng)的抗體   雜交帶

(4)乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子(2分)  顯微注射   受精卵   胚胎移植  乳汁

【解析】

試題分析:(1)結(jié)構(gòu)A是細(xì)菌等原核細(xì)胞中提取的質(zhì)粒,作為運(yùn)載體,其作用是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,使其在受體細(xì)胞中復(fù)制并表達(dá)。

(2)將目的基因?qū)氪竽c桿菌,通常用Ca2+處理細(xì)胞,增加細(xì)胞壁的通透性,使其處于感受態(tài),然后再將B重組質(zhì)粒溶于緩沖液中與受體細(xì)胞混合。

(3) 基因表達(dá)載體上目的基因首端未加入啟動(dòng)子,則沒有RNA聚合酶識(shí)別位點(diǎn),不能轉(zhuǎn)錄出抗腫瘤蛋白mRNA,為檢測(cè)是否翻譯出抗腫瘤蛋白,需從大腸桿菌中提取蛋白質(zhì),進(jìn)行抗原-抗體雜交,即用相應(yīng)的抗體進(jìn)行分子雜交,若有雜交帶出現(xiàn),表明目的基因已經(jīng)成功表達(dá)。

(4)構(gòu)建乳腺生物反應(yīng)器的方法來生產(chǎn)抗腫瘤蛋白,其大致過程為將目的基因與含有乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件的載體重組在一起,通過顯微注射導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中,體外培養(yǎng)至早期胚胎,經(jīng)過胚胎移植的方法送入母體內(nèi),使其生長(zhǎng)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,最后從雌性動(dòng)物的乳汁中提取抗腫瘤蛋白.

考點(diǎn):本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),意在考查考生取信息和分析問題的能力。

 

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