Question

【題目】我國曾經(jīng)發(fā)生過因“非典型性肺炎”而死亡的病例，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，該病是由SARS病毒（一種RNA病毒）感染所引起的疾病．SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體．某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作，其簡要的操作流程如圖：
（1）實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過程是 ．
（2）步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用限制酶和酶，后者的作用是將用限制性核酸內(nèi)切酶切割的S蛋白基因和連接起來．
（3）如果省略步驟②而將大量擴(kuò)增的S蛋白基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大腸桿菌中不能 ， 也不能 ．
（4）為了檢驗(yàn)步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用與SARS康復(fù)病人血清進(jìn)行抗原﹣抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，從而得出結(jié)論．
（5）步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列（填“相同”或“不同”），根本原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）反轉(zhuǎn)錄
（2）DNA連接；載體
（3）復(fù)制；合成S蛋白基因的mRNA
（4）大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白
（5）相同；表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同
【解析】解：（1）實(shí)驗(yàn)步驟①RNA控制DNA合成，該過程是反（逆）轉(zhuǎn)錄．（2）步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B，必須使用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和載體，形成相同的粘性末端，再用DNA連接酶，形成重組DNA．（3）如果省略步驟③基因表達(dá)載體的構(gòu)建，而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能進(jìn)行復(fù)制，也不能進(jìn)行以其為模板合成S基因的mRNA（或轉(zhuǎn)錄）．（4）步驟④檢測所表達(dá)的S蛋白的特征，可用大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白與SARS康復(fù)病人血清進(jìn)行抗原﹣抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，如果能夠特異性的結(jié)合，說明表達(dá)成功．（5）步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表達(dá)蛋白質(zhì)所用的目的基因相同． 所以答案是：（1）反轉(zhuǎn)錄；（2）DNA連接；載體；（3）復(fù)制；合成S蛋白基因的mRNA；（4）大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白；（5）相同；表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同
【考點(diǎn)精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識點(diǎn)，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)才能正確解答此題．