Question

17．蘋果園廣泛使用的一種除草劑（含氮有機(jī)物）在土壤中不易被降解，長期使用可污染土壤．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，科學(xué)工作者按甲圖程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）．

（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理．現(xiàn)有一升土壤浸出液，用無菌吸管吸取1mL液樣至盛有9mL無菌水的試管中，再稀釋10³倍．各取0.1mL已稀釋10³倍的水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為5.6×10⁹．
（2）科學(xué)工作者為修復(fù)被該除草劑污染土壤的目的來選擇細(xì)菌，所用培養(yǎng)基應(yīng)該在無氮培養(yǎng)基添加了該除草劑．
（3）接種技術(shù)的核心是防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度．在劃線接種時，連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個菌落，培養(yǎng)時，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主要原因是培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長．
（4）在培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮?dú)猓�有透明帶菌落利用的氮源主要是該除草劑，�?jù)此可篩選出目的菌．實(shí)驗結(jié)果如乙圖顯示的A～E五種菌株中，E是最理想菌株．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物生長，本題這種根據(jù)流程圖看，“無氮培養(yǎng)基+高濃度的除草劑”，說明A、B、C培養(yǎng)基中是以除草劑為唯一氮源．
2、每克樣品中的菌落數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下的平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL）M代表稀釋的倍數(shù)．

解答 解：（1）圖中稀釋的倍數(shù)是10⁸，三個菌落的平均數(shù)=（55+56+57）÷3=56，則每毫升樣品中菌株數(shù)=56÷1×10⁸=5.6×10⁹個，所以每升土壤浸出液中的菌株數(shù)=5.6×10⁹×10³=5.6×10¹²個．
（2）該除草劑為含氮有機(jī)物，為了選育能降解該除草劑的細(xì)菌，應(yīng)采用唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，即無氮的固體培養(yǎng)基中添加該除草劑．
（3）接種技術(shù)的核心是無菌操作，防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度．在劃線接種時，連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個菌落，培養(yǎng)時，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長，原因是培養(yǎng)基缺少這些細(xì)菌可利用的氮源．
（4）由于該除草劑的培養(yǎng)基不透明，被菌落分解后可產(chǎn)生透明帶，無透明帶說明除草劑未被分解，菌落利用的氮源就只能是空氣中的氮?dú)饬耍欢�出現(xiàn)透明帶說明除草劑被分解，菌落是分解該除草劑的細(xì)菌，氮源是該除草劑；E透明圈最大，故是最理想菌株．
故答案為：
（1）5.6×10¹²
（2）在無氮培養(yǎng)基添加了該除草劑
（3）防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度      稀釋獲得單個菌落        培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源
（4）氮?dú)庠摮�草�?nbsp;  E

點(diǎn)評 本題的知識點(diǎn)是微生物培養(yǎng)，篩選微生物的方法、微生物的數(shù)目的測定等方法，主要考查學(xué)生運(yùn)用微生物的培養(yǎng)技術(shù)解決生活中問題的能力和對微生物，是實(shí)驗室培養(yǎng)技術(shù)的綜合應(yīng)用能力．