Question

基因工程又叫基因拼接技術(shù)。

（1）在該技術(shù)中，用人工合成方法獲得目的基因的途徑之一是：以目的基因轉(zhuǎn)錄的________為模板，________成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成________。

（2）基因工程中常用的受體細(xì)胞有細(xì)菌、真菌、________。若將真核基因在原核細(xì)胞中表達(dá)，對該目的基因的基本要求是________。

（3）假設(shè)以大腸桿菌質(zhì)粒作為運(yùn)載體，并以同一種限制性內(nèi)切酶切割運(yùn)載體與目的基因，將切割后的運(yùn)載體與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶。連接產(chǎn)物至少有________種環(huán)狀DNA分子，它們分別是________。

Answer 1

（1）信使RNA（mRNA）　逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄）　雙鏈DNA（目的基因）

（2）動(dòng)植物細(xì)胞　除去內(nèi)含子

（3）3　運(yùn)載體自連的、目的基因片段自連的、運(yùn)載體與目的基因片段相連的環(huán)狀DNA分子

解析:

基因拼接技術(shù)一般要經(jīng)過四個(gè)步驟：一是獲取目的基因，二是目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，三是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，四是目的基因的檢測與表達(dá)。目的基因的獲取主要有兩種途徑，一是從供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因，二是人工合成基因。由于真核生物基因中有不表達(dá)的核苷酸序列（內(nèi)含子），所以要想真核生物的基因在原核細(xì)胞中表達(dá)，就必須除去目的基因中的內(nèi)含子。人工合成目的基因有兩種方法：一是通過mRNA→單鏈DNA→雙鏈DNA；二是根據(jù)蛋白質(zhì)氨基酸序列→mRNA序列→推測出結(jié)構(gòu)基因核苷酸序列→通過化學(xué)方法人工合成。常用的受體細(xì)胞有細(xì)菌、真菌和動(dòng)植物細(xì)胞。常用的運(yùn)載體有細(xì)菌的質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒。當(dāng)把切割后的運(yùn)載體與目的基因放在一起，并加入DNA連接酶，將會(huì)出現(xiàn)3種環(huán)狀的DNA分子。