Question

15．動物基因工程最令人興奮的應(yīng)用是建立生物反應(yīng)器來生產(chǎn)重要醫(yī)藥產(chǎn)品．抗凝血酶Ⅲ蛋白是一種血漿糖蛋白，臨床上主要用于血液性疾病的治療．下圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程圖．請回答下列問題：

（1）短時間內(nèi)大量擴增抗凝血酶Ⅲ蛋白基因經(jīng)常采用PCR技術(shù)．過程①是將抗凝血酶Ⅲ蛋白基因?qū)�入受精卵，該過程常用的方法是顯微注射法．
（2）過程②包括早期胚胎培養(yǎng)（或“動物細胞培養(yǎng)”） 技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；為獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢，在過程②還可使用胚胎分割技術(shù)．
（3）若要檢測牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
（4）如果檢測發(fā)現(xiàn)抗凝血酶Ⅲ蛋白基因被成功導入了受精卵，但卻沒有檢測到抗凝血酶Ⅲ蛋白的存在，那應(yīng)該考慮分別位于目的基因首端的啟動子和末端的終止子沒有設(shè)計好，應(yīng)從這方面進一步改善．

Answer 1

分析 1、與自然條件下的DNA復制相比，PCR擴增技術(shù)的不同之處在于：需要引物，需要耐高溫的熱穩(wěn)定性DNA聚合酶．
2、基因工程的操作步驟中，在導入目的基因之前，需要構(gòu)建基因表達載體，即將目的基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起．
3、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）利用PCR技術(shù)能在體外大量擴增目的基因（抗凝血酶Ⅲ蛋白基因）．過程①是將目的基因?qū)�入受體細胞，常用的方法是顯微注射法．
（2）過程②包括早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)；來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此可用胚胎分割技術(shù)獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢．
（3）若要檢測目的基因是否表達形成相應(yīng)的蛋白質(zhì)可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
（4）基因表達載體由啟動子、終止子、標記基因和目的基因組成．啟動子位于首端，終止子位于尾端．
故答案為：
（1）PCR        顯微注射法
（2）早期胚胎培養(yǎng)（或“動物細胞培養(yǎng)”） 胚胎移植    胚胎分割
（3）抗原-抗體雜交  
（4）啟動子  終止子

點評 本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記胚胎移植的基本程序和胚胎分割技術(shù)的特點，能結(jié)合所學的知識準確答題．