Question

【題目】目前，精子載體法逐漸成為最具誘惑力的制備轉基因動物方法之一，該方法以精子作為外源基因的載體，使精子攜帶外源基因進入卵細胞受精．如圖表示利用該方法制備轉基因鼠的基本流程．請據(jù)圖回答：

（1）獲取外源基因用到的工具酶是_____，為了提高實驗成功率，通常利用_____技術獲得大量標記的外源基因。

（2）外源基因能夠整合到精子的_____上是提高轉化率的關鍵，因為受精時只有精子的_____才能進入卵細胞中。

（3）過程②采用的是_____技術，該過程中應對已經(jīng)導入外源基因的精子進行_____處理。

（4）過程③需要在_____（至少寫出兩點）等條件下進行．由于人們對動物細胞所需營養(yǎng)物質還沒有完全搞清楚，因此在培養(yǎng)細胞時需在培養(yǎng)基中加入一定量的_____。

（5）為了獲得更多的早期胚胎，常用_____激素對供體進行處理，使其_____，從而獲得更多的卵母細胞。

Answer 1

【答案】限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） PCR 染色體 頭部（細胞核） 體外受精 獲能 無菌無毒、適宜的溫度和PH、營養(yǎng)充足、氣體環(huán)境 動物血清（或血漿） 促性腺 超數(shù)排卵

【解析】

1、分析圖可知，通過轉基因技術將目的基因導入到成熟精子的染色體中，再通過體外受精作用將目的基因移入到受精卵中，再通過早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植，最終獲得轉基因鼠。①過程是轉化目的基因進入精子的染色體上，②過程是體外受精，③過程是早期胚胎培養(yǎng)，④過程是胚胎移植。

2、PCR技術擴增目的基因（適用于目的基因的核苷酸序列已知的情況）。PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術，其原理是DNA復制，需要模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），以指數(shù)的方式擴增，即約2n，可以在短時間內(nèi)大量擴增目的基因。

（1）獲取目的基因時，需要限制酶切割。為了提高實驗成功率，可以通過PCR擴增技術，在短時間內(nèi)大量擴增目的基因。

（2）精子與卵細胞受精時，精子的頭部進入卵細胞中，并釋放其細胞核進入卵細胞，但細胞質未進入。為了提高轉化率，必須將外源基因整合到精子的染色體中，才可以使外源基因進入受精卵中。

（3）②過程是攜帶外源基因的精子與卵細胞發(fā)生體外受精，形成受精卵。精子必須獲能才可以與卵細胞發(fā)生受精作用。

（4）受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)液成分一般都比較復雜，除了含有各種無機鹽、有機鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸、激素等外，還要添加動物血清（或血漿）等物質。

（5）卵母細胞的采集可以用促性腺激素作用于雌性動物，使其超數(shù)排卵，從而獲取較多的卵母細胞。