Question

長(zhǎng)期以來(lái) ,香蕉生產(chǎn)遭受病害的嚴(yán)重威脅 ,制約了其發(fā)展。目前 ,隨著轉(zhuǎn)基因抗病香蕉基因工程技術(shù)的日趨成熟 ,為培育抗病香蕉品種開辟了新途徑。轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如圖所示，質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答：

（1）構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶 ，對(duì) 進(jìn)行切割。

（2）培養(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有 ，作為標(biāo)記基因。

（3）能使抗病基因在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是： (填字母序號(hào))。

A.啟動(dòng)子 B.終止子 C.復(fù)制原點(diǎn) D.標(biāo)記基因

（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用方法有多種，圖中所示方法為 。

（5）欲檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功，可采用的技術(shù)

（6）利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株。香蕉組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了含有一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還必須含有 等植物激素，它們會(huì)在 （填圖中標(biāo)號(hào)）階段發(fā)揮作用，同時(shí) （填圖中標(biāo)號(hào)）階段還需要給予一定光照。

（7）從香蕉組織塊到獲得轉(zhuǎn)基因抗病香蕉試管苗的過(guò)程中，需經(jīng)過(guò) 。(填數(shù)字)

①無(wú)絲分裂 ②有絲分裂 ③減數(shù)分裂 ④ 原代培養(yǎng) ⑤ 傳代培養(yǎng)

⑥ 植物體細(xì)胞雜交 ⑦ 細(xì)胞融合 ⑧ 脫分化 ⑨ 再分化

 

Answer 1

（1）PstⅠ、EcoRⅠ含抗病基因的DNA

（2）抗卡那霉素基因

（3）AB

（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

（5）抗原-抗體雜交

（6）生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素 ①和② ②

（7）②⑧⑨

【解析】

試題分析：（1）從圖可看出，只有PstⅠ、EcoRⅠ兩種酶能保持抗病基因結(jié)構(gòu)的完整性，所以構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ兩種酶，對(duì)抗病基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割。

（2）卡那霉素能抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有抗卡那霉素基因，以此作為標(biāo)記基因。

（3）啟動(dòng)子和終止子能啟動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄與終止，是使抗病基因在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列。

（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法．圖中采用的是最常用的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

（5）檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用DNA分子雜交技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，采用分子雜交技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)，采用抗原-抗體雜交技術(shù)。

（6）植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需要的植物激素是：生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，在①脫分化和②再分化中發(fā)揮重要作用，在②再分化過(guò)程中需要給予一定的光照，利用芽的分化。

（7）從香蕉組織塊到獲得轉(zhuǎn)基因抗病香蕉試管苗的過(guò)程中，需經(jīng)過(guò)②有絲分裂、⑧脫分化、⑨再分化。

考點(diǎn)：本題考查基因工程、植物組織培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。