近20年來，PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖)，在短時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，從而使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。

(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開，稱為________；而在細(xì)胞中是在________酶的作用下進(jìn)行的。
(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個(gè)特定區(qū)段，應(yīng)該加入________種特定的引物。當(dāng)溫度降低至55 ℃時(shí)，引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的________端連接脫氧核苷酸，兩條子鏈的延伸方向都是____________。
(3)PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有三個(gè)條件，即液體環(huán)境、適宜的________和________，前者由________自動(dòng)調(diào)控，后者則靠____來維持。
(4)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制，如果將一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中，以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制四次之后，則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是________。

(1)氫　解旋　解旋   (2)兩　3′　從子鏈的5′端向3′端延伸  (3)溫度　酸堿度　PCR儀　緩沖液  (4)1/8

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近20年來，PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制（如圖），在短時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，從而使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。

（1）加熱使DNA雙鏈間的______鍵完全打開，稱為_______；而在細(xì)胞中是在_______酶的作用下進(jìn)行的。
（2）如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個(gè)特定區(qū)段，應(yīng)該加入__________種特定的引物。當(dāng)溫度降低至55℃時(shí)，引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的__________端連接脫氧核苷酸，兩條子鏈的延伸方向都是_________。
（3）PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有三個(gè)條件，即液體環(huán)境、適宜的_________和________，前者由________自動(dòng)調(diào)控，后者則靠_______來維持。
（4）通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制，如果將一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中，以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制四次之后，則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是____________。

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科目：高中生物 來源：2012-2013學(xué)年黑龍江省鶴崗一中高二下學(xué)期期末考試生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

基因工程自20世紀(jì)70年代興起后，發(fā)展迅猛，成果顯著。
Ⅰ利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等，其中啟動(dòng)子的作用是       ______。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，常用            處理大腸桿菌，以利于表達(dá)載體進(jìn)入；為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術(shù)稱為       __________   。為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄的mRNA是否翻譯成蛋白質(zhì)，常用______________________技術(shù)。
Ⅱ近10年來，PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)手段，下圖為PCR原理示意圖，據(jù)圖回答問題。

（1）基因工程中，利用PCR技術(shù)來________________，PCR技術(shù)依據(jù)的原理是DNA的半保留復(fù)制，生物體內(nèi)也能完成DNA的復(fù)制，但有所不同，圖中A過程稱為____________，在生物體內(nèi)需要____________才能完成。圖中B 過程的完成需要_________等條件（3分）。
（2）若DNA樣品的長(zhǎng)度為100個(gè)堿基對(duì)，且A占15%，則完成三次循環(huán)，共需要提供的胞嘧啶脫氧核苷酸___________個(gè)。

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科目：高中生物 來源：2014屆陜西渭南市高二下學(xué)期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題

近20年來，PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制（如圖），在短時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，從而使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。

（1）加熱使DNA雙鏈間的______鍵完全打開，稱為_______；而在細(xì)胞中是在_______酶的作用下進(jìn)行的。

（2）如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個(gè)特定區(qū)段，應(yīng)該加入__________種特定的引物。當(dāng)溫度降低至55℃時(shí)，引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的__________端連接脫氧核苷酸，兩條子鏈的延伸方向都是_________。

（3）PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有三個(gè)條件，即液體環(huán)境、適宜的_________和________，前者由________自動(dòng)調(diào)控，后者則靠_______來維持。

（4）通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制，如果將一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中，以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制四次之后，則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是____________。

 

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科目：高中生物 來源：2013屆山西省高二3月月考考試文科生物試卷（解析版） 題型：綜合題

近20年來，PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖)，在短時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，從而使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。

(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開，稱為________；而在細(xì)胞中是在________酶的作用下進(jìn)行的。

(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個(gè)特定區(qū)段，應(yīng)該加入________種特定的引物。當(dāng)溫度降低至55 ℃時(shí)，引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的________端連接脫氧核苷酸，兩條子鏈的延伸方向都是____________。

(3)PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有三個(gè)條件，即液體環(huán)境、適宜的________和________，前者由________自動(dòng)調(diào)控，后者則靠____來維持。

(4)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制，如果將一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中，以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制四次之后，則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是________。

 

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