Question

【題目】閱讀以下資料，回答相關(guān)問題。

資料1：小鼠制備的抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕試劑盒”，檢測早孕的準確率在90%以上。

資料2：葡萄糖異構(gòu)酶在工業(yè)上應用廣泛，為提高其熱穩(wěn)定性，朱國萍等人在確定第138位甘氨酸為目標氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，結(jié)果其最適反應溫度提高了10—12℃，使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)更具剛性。

資料3：巴西是全球最大的甘蔗生產(chǎn)國，但是甘蔗易受螟蟲的侵害。2017年6月8日，巴西向世界宣布，全球首款能抵抗螟蟲的轉(zhuǎn)基因甘蔗已培育成功，并且批準該品種進入市場。

資料4：大腸埃希菌，俗稱大腸桿菌。是人和動物腸道中的正常棲居菌。自來水一旦被它污染，就有可能引發(fā)腸道傳染病，甚至流行病。因此，必須對自來水進行嚴格的檢測，以確保飲水安全。我國規(guī)定1000ml自來水中的大腸桿菌數(shù)不得超過3個。

（1）資料1中，在該“單抗”的生產(chǎn)過程中，將______________作為抗原對小鼠進行接種后，從脾臟中提取B淋巴細胞，并設(shè)法將其與鼠的骨髓瘤細胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，選出融合的雜種細胞，對該細胞還需進行____________________，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的符合需要的____________。單克隆抗體最主要的優(yōu)點有_________________。

（2）資料2中提到的生物技術(shù)屬于____工程的范疇。在該實例中，直接需要操作的____________（選填“肽鏈結(jié)構(gòu)”、“蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)”、“基因結(jié)構(gòu)”）。

（3）資料3中獲得轉(zhuǎn)基因甘蔗的過程中，核心步驟是________________________，為了避免目的基因和運載體的自身連接成環(huán)和反向連接，應該采取的措施是用____________________對目的基因和載體分別進行切割。

（4）實驗前應進行無菌處理。將漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進行_________________滅菌。培養(yǎng)基進行_______________滅菌。為了鑒定大腸桿菌，在培養(yǎng)基中應加入_______________________。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)_________________色。

Answer 1

【答案】人絨毛膜促性腺激素 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測 雜交瘤細胞 特異性強、靈敏度高，并可大量制備 蛋白質(zhì) 基因結(jié)構(gòu) 基因表達載體的構(gòu)建 使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的（不同）限制酶 干熱 高壓蒸汽 伊紅—美藍 黑

【解析】

1、單克隆抗體的制備過程的細節(jié)：

（1）二次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；

②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。

（2）細胞來源：B淋巴細胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無限繁殖；

骨髓瘤細胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖。

（3）雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。

（4）提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。

2、單克隆抗體優(yōu)點：特異性強，靈敏度高，能大量制備。

3、基因工程的基本操作程序

第一步：目的基因的獲取；

第二步：基因表達載體的構(gòu)建；

第三步：將目的基因?qū)�入受體細胞；

第四步：目的基因的檢測和表達。

（1）資料1中，在該“單抗”的生產(chǎn)過程中，將人絨毛膜促性腺激素作為抗原對小鼠進行接種后，從脾臟中提取B淋巴細胞，并設(shè)法將其與鼠的骨髓瘤細胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，選出融合的雜種細胞，對該細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的符合需要的雜交瘤細胞。單克隆抗體最主要的優(yōu)點有特異性強、靈敏度高，并可大量制備。

（2）資料2是改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，使之符合人類需求，屬于蛋白質(zhì)工程，其原理是通過改造基因來獲得相應功能的蛋白質(zhì)。

（3）基因工程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是構(gòu)建基因表達載體，為了避免目的基因和運載體的自身連接成環(huán)和反向連接，應該采取的措施是使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的（不同）限制酶對目的基因和運載體分別進行切割。

（4）微生物培養(yǎng)過程中要注意防止雜菌污染，培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進行干熱或高壓蒸汽滅菌，為了鑒定大腸桿菌，在培養(yǎng)基中應加入伊紅——美藍。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色。