Question

【題目】小明欲從土壤中分離尿素分解菌，請(qǐng)回答下列問題：

(1)分離并計(jì)數(shù)尿素分解菌時(shí)，需要配制以尿素為唯一氮源的__________ (填“固體選擇”“液體鑒別”“固體鑒別”或“液體選擇”)培養(yǎng)基。

(2)選取10g土樣后進(jìn)行一系列稀釋，分別吸取0.1mL的104、105、106倍稀釋的菌液在滅菌板上進(jìn)行__________接種，接種前至少要準(zhǔn)備__________個(gè)滅菌平板。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：106倍稀釋的菌液對(duì)應(yīng)平板上的菌落數(shù)為124、118、109，則每克土樣中的活菌數(shù)為________個(gè)。

(3)其他同學(xué)認(rèn)為小明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏大，可能原因是操作出現(xiàn)錯(cuò)誤。為了排除其他同學(xué)的質(zhì)疑，你給小明的建議是______________________________。

(4)為了鑒定分離出來的菌種是否為尿素分解菌，需要在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入__________，根據(jù)顏色變化判別。

Answer 1

【答案】固體選擇 涂布 10 1.17×108 選取同樣的土樣重復(fù)實(shí)驗(yàn)，吸取菌液時(shí)注意充分搖勻，若兩次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果基本相同，則說明沒有出現(xiàn)操作錯(cuò)誤 酚紅指示劑

【解析】

微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，常用的滅菌方法主要有高壓蒸汽滅菌法、灼燒滅菌法和干熱滅菌法。常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法可以用來進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，酚紅指示劑可以檢測(cè)尿素分解菌，剛果紅染液可以鑒定纖維素分解菌。

（1）分離尿素分解菌需要配制以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）對(duì)細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)要采用 稀釋涂布平板法。每個(gè)稀釋倍數(shù)的菌液都要涂布3個(gè)平板，即104、105、106倍稀釋的菌液要涂布9個(gè)平板， 另外還需要準(zhǔn)備1個(gè)空白平板作為空白對(duì)照，所以至少需要準(zhǔn)備10個(gè)滅菌平板。每克土樣中的活菌數(shù)為 （124+118+109）÷3×0.l×106 ×10=l.17×108（個(gè)）。

（3）其他同學(xué)認(rèn)為該同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏大，可能原因是操作出現(xiàn)錯(cuò)誤，即可能涂布時(shí)吸取了下層的菌液，導(dǎo)致活菌數(shù)偏多。為了排除其他同學(xué)的質(zhì)疑，該同學(xué)應(yīng)該選取同樣的土樣重復(fù)實(shí)驗(yàn)，吸取菌液時(shí)注意充分搖勻，若兩次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果基本相同，則說明沒有出現(xiàn)操作錯(cuò)誤。

（4）鑒別尿素分解菌可以選用以尿素為唯一氮源且添加了酚紅指示劑的鑒別培養(yǎng)基。