回答下列關(guān)于微生物的問題.
營養(yǎng)缺陷型是指野生型菌株由于基因突變,致使細(xì)胞合成途徑出現(xiàn)某些缺陷,喪失合成某些物質(zhì)的能力,如氨基酸、維生素、堿基等的合成能力出現(xiàn)缺陷,必須在基本培養(yǎng)基(野生型菌株最低營養(yǎng)要求)中添加缺陷的營養(yǎng)物質(zhì)(補(bǔ)充培養(yǎng)基)才能正常生長的一類突變株.基本培養(yǎng)基中加入一些營養(yǎng)物質(zhì),可以滿足該微生物的各種營養(yǎng)缺陷型生長的培養(yǎng)基稱為完全培養(yǎng)基.營養(yǎng)缺陷型在基礎(chǔ)理論研究和生產(chǎn)應(yīng)用中有廣泛作用.青霉素能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的生物合成,可用于淘汰野生型菌株.篩選營養(yǎng)缺陷型菌株一般通過四個環(huán)節(jié),即誘變、淘汰野生型、檢出和鑒定營養(yǎng)缺陷型.
(1)取新活化枯草芽孢桿菌制備菌懸液,再用紫外線照射處理.下列關(guān)于將誘變后存活的個體培養(yǎng),淘汰野生型菌株的做法和原理,正確的是
(多選)
A、培養(yǎng)在含有青霉素的基本培養(yǎng)基中,淘汰野生型菌株,保留缺陷型菌株
B、培養(yǎng)在含有青霉素的補(bǔ)充培養(yǎng)基中,淘汰野生型菌株,保留缺陷型菌株
C、完全培養(yǎng)基中青霉素可以殺死野生型菌株,缺陷型菌株得以生存
D、補(bǔ)充培養(yǎng)基中缺陷型菌株可以生存,野生型菌株不能生存
E、基本培養(yǎng)基中野生型可以生長繁殖,青霉素將其殺死
F、基本培養(yǎng)基中缺陷型不可以生長繁殖,青霉素不能將其殺死
(2)在培養(yǎng)皿倒上一層不含菌的基本培養(yǎng)基,待冷凝后加上一層含菌的基本培養(yǎng)基,其后再澆上一層不含菌的基本培養(yǎng)基.經(jīng)培養(yǎng)后出現(xiàn)菌落,在皿底將菌落標(biāo)記為A
1、A
2…,然后在其上再倒一薄層完全培養(yǎng)基,再培養(yǎng),出現(xiàn)新的菌落,在皿底標(biāo)記為B
1、B
2…,則A菌落與B菌落分別較可能是
、
(均選填野生型/突變型).
(3)將待測菌落處理后涂布于某培養(yǎng)基平板上培養(yǎng),用滅菌牙簽逐個挑取待測菌,先后點(diǎn)接于A培養(yǎng)基和B培養(yǎng)基平板上.前后位置及號碼相對應(yīng).培養(yǎng)后觀察.如圖一.為檢出營養(yǎng)缺陷型,A、B培養(yǎng)基應(yīng)分別為
培養(yǎng)基、
培養(yǎng)基.菌落
為營養(yǎng)缺陷型.
(4)為鑒定上步檢出的營養(yǎng)缺陷型是哪種營養(yǎng)缺陷型,將待測菌種懸液涂于圖二含有基本培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)皿背面劃線標(biāo)注C、D、E三區(qū).C、D、E為三濾紙片,分別浸有氨基酸混合液、維生素混合液和堿基混合液.培養(yǎng)后觀察.當(dāng)觀察到
現(xiàn)象,說明是該營養(yǎng)缺陷型.圖二培養(yǎng)基也可稱為
培養(yǎng)基.
(5)如檢測菌為堿基類營養(yǎng)缺陷型,要進(jìn)一步鑒定是哪種堿基營養(yǎng)缺陷型,可同圖二方法加浸該營養(yǎng)物質(zhì)的濾紙片,如加浸
的濾紙片.