11．將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合，可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體，下列有關(guān)此項技術(shù)的說法中不正確的是（　�。�

	A．	動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)
	B．	B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞直接放入培養(yǎng)液中就能融合為雜交瘤細(xì)胞
	C．	實驗中雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖的方式是主動運輸
	D．	按照培養(yǎng)基的用途分類，實驗中篩選雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基

10．小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應(yīng)，為了克服這個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因（目的基因）后再重組表達(dá)．下列相關(guān)敘述正確的是（　�。�

	A．	設(shè)計擴增目的基因的引物時不必考慮表達(dá)載體的序列
	B．	用PCR方法擴增目的基因時必須知道基因的全部序列
	C．	PCR體系中一定要添加從受體細(xì)胞中提取的DNA聚合酶
	D．	一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞

9．如圖為單克隆抗體生產(chǎn)過程示意圖，請據(jù)圖回答問題：
（1）傳統(tǒng)制備抗體的方法是向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使B細(xì)胞和記憶細(xì)胞增殖、分化為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，然后從動物血清中分離所需抗體
（2）與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合不同的是，②過程還可以使用滅活誘導(dǎo)融合．
②過程誘導(dǎo)后，用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的特點是即可大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（3）將經(jīng)過③過程得到的能分泌專一抗體的雜交瘤細(xì)胞注入到小鼠腹腔中，一段時間后從小鼠腹水中就可以提取大量的鼠源性單克隆抗體．
（4）給某患者連續(xù)隔周注射某種鼠源性單抗治療一種病毒感染性疾病，開始病毒量明顯減少，一段時間后，病毒量又開始上升，上升的原因可能是病毒發(fā)生了變異，也可能是人體產(chǎn)生了能與鼠源性抗體特異性結(jié)合的抗體，使鼠源性單抗不能發(fā)揮抗病毒的作用．
（5）研究人員可應(yīng)用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，改造鼠源性單抗分子的結(jié)構(gòu)，降低人體對鼠源性單抗的免疫反應(yīng)．

8．以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原，利用細(xì)胞工程方法可制備出SARS病毒的單克隆抗體．請根據(jù)圖回答以下問題：
（1）首先將特定的抗原注射入小鼠體內(nèi)，然后從小鼠的脾臟中獲得B淋巴細(xì)胞．
（2）將B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，融合過程中使用的與植物體細(xì)胞雜交不同的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒．經(jīng)過誘導(dǎo)后，考慮兩兩融合，能獲得3種雜交細(xì)胞，因此還要用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，通過多次最終篩選獲得的雜種細(xì)胞應(yīng)具有的特點是既能無限增殖，又能產(chǎn)生所需抗體．
（3）將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，培養(yǎng)基是按照細(xì)胞的需求將各種營養(yǎng)物質(zhì)按一定比例進(jìn)行配制的，該培養(yǎng)基需加入糖、氨基酸、無機鹽和促生長因子、微量元素及血清血漿等，通入二氧化碳的主要目的是維持pH穩(wěn)定．
（4）該技術(shù)的基礎(chǔ)是動物細(xì)胞培養(yǎng)，利用制備的單克隆抗體可準(zhǔn)確地診斷出SARS病毒感染者，原理是針對SARS病毒的抗體具有特異性，可以與SARS病毒特異性結(jié)合．

7．2009年10月，我國自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻“華恢1號”獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的安全證書．下圖表示該抗蟲水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

（1）④過程應(yīng)用的主要生物技術(shù)是植物組織培養(yǎng)；該技術(shù)的過程主要包括脫分化和再分化兩個階段，利用的基本原理是植物細(xì)胞的全能型．
（2）殺蟲基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計并人工合成的蛋白質(zhì)，這屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)范疇．
（3）組建理想的載體需要對天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造．如圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制性內(nèi)切酶作用位點），據(jù)圖分析：

①人工改造時，要使抗蟲基因表達(dá)，還應(yīng)插入啟動子．
②人工改造時用限制酶Ⅱ處理，其目的是：第一，去除質(zhì)粒上的tms和tar（基因），保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會引起細(xì)胞的無限分裂和生長；第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點，有利于目的基因準(zhǔn)確插入．第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等．
③若用限制酶Ⅰ分別切割改造過的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒．分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長的現(xiàn)象是在含卡那霉素的培養(yǎng)基能夠生長，在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長．
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端為，則該酶識別的核苷酸序列是GACGTC．

6．用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，所采用的技術(shù)有（　　）
①細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)②細(xì)胞融合技術(shù)③抗體檢測技術(shù)④細(xì)胞篩選⑤核移植技術(shù)⑥免疫學(xué)技術(shù)．

A．

②③④

B．

①②③④⑥

C．

②③⑤

D．

④⑤⑥

5．生產(chǎn)單克隆抗體時，要在培養(yǎng)基中加入特定的試劑篩選出雜交瘤細(xì)胞．下列可作為這種試劑的是（　　）

	A．	能選擇性地抑制骨髓瘤細(xì)胞DNA復(fù)制的試劑
	B．	能激活B淋巴細(xì)胞的原癌基因的試劑
	C．	能阻止雜交瘤細(xì)胞核糖體上所有蛋白質(zhì)合成的試劑
	D．	能抑制B淋巴細(xì)胞DNA復(fù)制的試劑

4．2009年春末，甲型H1N1流感病毒成為全人類共同的敵人．某生物工程公司擬利用細(xì)胞工程方法，以甲型H1N1病毒衣殼蛋白為抗原制備單克隆抗體．相關(guān)敘述正確的是（　�。�

	A．	將純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體
	B．	體外培養(yǎng)單個漿細(xì)胞還可以獲得大量針對甲型H1N1病毒的淋巴因子
	C．	將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞
	D．	利用該單克隆抗體與甲型H1N1病毒衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者

3．埃博拉病毒（EBO）呈纖維狀，EBO衣殼外有包膜，包膜上有5種蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最為關(guān)鍵，能被宿主細(xì)胞強烈識別．EBO結(jié)構(gòu)及基因組如圖1所示．目前尚無針對該病毒的特效藥或疫苗．

（1）埃博拉病毒（EBO）的遺傳物質(zhì)是RNA，EBO病毒容易變異的原因是RNA是單鏈結(jié)構(gòu)，穩(wěn)定性較差．．
（2）科研人員利用經(jīng)EBO免疫后小鼠的B淋巴（效應(yīng)B或漿）細(xì)胞與鼠的瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交，獲得純凈的單一品種抗體，其特點是特異性強、靈敏度高、反應(yīng)快（產(chǎn)量大），可以用此抗體與藥物制成“生物導(dǎo)彈”，抗擊埃博拉病毒（EBO）．
（3）圖2表示轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)埃博拉病毒蛋白疫苗與重組病毒粒子疫苗的基本過程．
①該技術(shù)的目的基因最好選擇GP蛋白基因（GP或GP基因）．
②實驗發(fā)現(xiàn)，用昆蟲細(xì)胞替代酵母菌承擔(dān)輔助重組質(zhì)粒與重組病毒的共轉(zhuǎn)染，也能收集到目的基因表達(dá)的蛋白質(zhì)，這一現(xiàn)象說明不同生物共用一套遺傳密碼．
③以EBO病毒包膜蛋白作為疫苗比較安全，其原因是蛋白質(zhì)不具侵染性，不會破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)．
④重組病毒中須除去腺病毒復(fù)制激活基因（E），目的是使重組病毒不能在人體內(nèi)大量復(fù)制，提高了疫苗的安全性．

2．胰島B細(xì)胞移植是一種有效治療糖尿病的方法．利用小鼠再生胰腺提取物（RPE）可定向誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞（hAMSCs）分化成胰島B細(xì)胞．請回答下列問題：

（1）取人羊膜組織刮除血塊、上皮細(xì)胞，沖洗后剪碎，然后用胰蛋白酶處理，去除細(xì)胞表面（糖）蛋白，使細(xì)胞分散開，最終制成hAMSCs懸液．將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)，先后出現(xiàn)細(xì)胞貼壁生長、接觸抑制現(xiàn)象象，直至細(xì)胞停止分裂增殖，這時需要將細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)處理，然后進(jìn)行傳代培養(yǎng)．
（2）取傳至第3代的hAMSCs放入細(xì)胞培養(yǎng)板，同時加入RPE進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)．該代hAMSCs能保持細(xì)胞正常的（二倍體）核型．誘導(dǎo)分化培養(yǎng)15天后，提取細(xì)胞的RNA（或mRNA），用胰島素基因探針進(jìn)行分子雜交，可初步檢測hAMSCs是否分化成胰島B細(xì)胞．
（3）用人的雜交瘤細(xì)胞來生產(chǎn)人源單克隆抗體難以成功，因此單克隆抗體大都來自鼠源．但鼠源單抗在人體內(nèi)使用，會產(chǎn)生較強的免疫原性，為解決這一問題，發(fā)明了嵌合抗體．大致過程如圖所示，嵌合抗體能降低鼠源抗體的免疫原性，從圖中可以推測，免疫原性的產(chǎn)生主要與抗體的C（選填“V區(qū)”、“C區(qū)”）有關(guān)．構(gòu)建的人鼠嵌合抗體基因表達(dá)載體除了標(biāo)記基因和目的基因外，還有啟動子、終止子．
（4）科學(xué)家們用細(xì)胞融合實驗證明，分化的細(xì)胞中存在“閑置不用”的結(jié)構(gòu)基因．他們把大鼠肝腫瘤細(xì)胞和小鼠成纖維細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，篩選出含有兩套肝細(xì)胞染色體和一套成纖維細(xì)胞染色體的細(xì)胞．這些細(xì)胞既保持了合成大鼠肝細(xì)胞3種特異蛋白的能力，也合成了小鼠干細(xì)胞的這3種蛋白，但是在正常的小鼠成纖維細(xì)胞中從不合成這些．由此可見，融合實驗證明了小鼠成纖維細(xì)胞含有不表達(dá)的但肝細(xì)胞專一表達(dá)的基因，在特定條件下這些“閑置基因”也可表達(dá)．