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PCR技術(shù)為分子生物實(shí)驗(yàn)的一種常規(guī)手段,在很短的時(shí)間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍,使分子生物實(shí)驗(yàn)所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體(如下圖)。請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1)PCR是 的縮寫。PCR是利用DNA雙鏈復(fù)制的原理,在 復(fù)制特定的DNA片斷。
(2)利用PCR獲取目的基因的前提是,要有已知目的基因的一段核苷酸序列,以便合成引物;反應(yīng)中除了需要模板DNA 外,還需要四種原料:dCTP、dATP、dGTP、dTTP以及 _______酶。
(3)加熱至94℃的目的是使DNA樣品的________鍵斷裂解鏈;冷卻到__________℃,引物與單鏈遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合,然后再加熱到70—75℃,在酶的作用下繼續(xù)互補(bǔ)鏈的合成。如此重復(fù)循環(huán)多次,DNA片斷的數(shù)量以_______形式擴(kuò)增。
資料顯示,近10年來,PCR技術(shù)(聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù))成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的一種常規(guī)手段。它利用DNA半保留復(fù)制的特性,在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖所示),在很短時(shí)間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍,使分子生物實(shí)驗(yàn)所需的遺傳物質(zhì)不再受限于自生物體獲得。請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1)加熱至94℃的目的是使樣品中DNA的氫鍵斷裂,這一過程在生物體細(xì)胞內(nèi)是通過________的作用完成的。通過生化分析得到新合成的DNA分子中,A=T,G=C,這個(gè)事實(shí)說明DNA分子合成遵循______________________。
(2)新合成的DNA分子與模板DNA分子完全相同的原因是____________________________________________________________________________。
(3)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制時(shí),若將一個(gè)用15N標(biāo)記的模板DNA分子(第一代)放入試管中,以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料,連續(xù)復(fù)制到第五代時(shí),含15N標(biāo)記的DNA分子單鏈數(shù)占全部DNA總單鏈數(shù)的比例為________。
(2008鎮(zhèn)江模擬)近10年來,PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段,其原理是利用DNA半保留復(fù)制,在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如下圖所示),在很短的時(shí)間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍,使實(shí)驗(yàn)室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。
(1)加熱至94℃的目的是使DNA樣品的_________鍵斷裂,這一過程在生物體細(xì)胞內(nèi)是通過_________酶的作用來完成的。
(2)當(dāng)溫度降低時(shí),引物與模板末端結(jié)合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最終合成2條DNA分子,此過程中原料是_________,遵循的原則是___________________________。
(3)“PCR”技術(shù)的必需條件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少還要三個(gè)條件,即液體環(huán)境、適宜的_________和__________________。
(4)通過“PCR”技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制,若將一個(gè)用標(biāo)記的DNA分子放入試管中,以標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料,連續(xù)復(fù)制四次之后,則標(biāo)記的DNA分子占全部DNA總數(shù)的比例為_________。
資料顯示,近10年來,PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù))成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的一種常規(guī)手段,其利用DNA半保留復(fù)制的特性,在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如下圖),在很短的時(shí)間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍,使分子生物實(shí)驗(yàn)所需的遺傳物質(zhì)不再受限于獲得生物體。請(qǐng)據(jù)圖回答:
⑴加熱至94℃的目的是使樣品中DNA的氫鍵斷裂,這一過程在生物體細(xì)胞內(nèi)是通過____________的作用完成的。
⑵通過生化分析得出新合成的DNA分子中,A=T,G=C,這個(gè)事實(shí)說明DNA分子合成遵循 。
⑶在新合成的DNA分子中,(A+T)/(G+C)的比率與DNA樣品中的一樣,這說明新DNA分子是 。
⑷通過PCR技術(shù),使DNA分子大量復(fù)制時(shí),若將一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA樣品分子(第一代)放入試管中,以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料,連續(xù)復(fù)制到第五代之后,含15N標(biāo)記的DNA分子鏈數(shù)占全部DNA總鏈數(shù)的比例為 。
⑸選擇PCR技術(shù)與人體細(xì)胞內(nèi)DNA的合成過程可知,二者的必需條件中,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少還有3個(gè)分別是 。
⑹PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利,而且改進(jìn)了檢測細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測一個(gè)人是否感染了艾滋病,你認(rèn)為可用PCR技術(shù)擴(kuò)增他血液中的( 。
A.白細(xì)胞DNA B.病毒的蛋白質(zhì) C.血漿中的抗體 D.病毒的核酸
資料顯示,近10年來,PCR技術(shù)(DNA聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù))成為分子生物實(shí)驗(yàn)的一種常規(guī)手段,其原理是利用DNA半保留復(fù)制的特性,在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如下圖),在很短的時(shí)間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍,使分子生物實(shí)驗(yàn)所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1)加熱至94℃的目的是使DNA樣品的 鍵斷裂,這一過程在生物體細(xì)胞內(nèi)是
通過 的作用來完成的。通過生化分析得出新合成的DNA分子中,A=T、G=C這個(gè)事實(shí)說明DNA分子的合成遵循 。
(2)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制時(shí),若將一個(gè)用15N標(biāo)記的模板DNA分子(第一代)放入試管中,以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料,連續(xù)復(fù)制到第5代時(shí),含15N標(biāo)記的DNA分子單鏈數(shù)占全部DNA總單鏈數(shù)的比例為 。
(3)PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利,而且改進(jìn)了檢測細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測一個(gè)人是否感染了艾滋病病毒,你認(rèn)為可用PCR技術(shù)擴(kuò)增他血液中的( )
A.白細(xì)胞DNA | B.病毒蛋白質(zhì) | C.血漿蛋白 | D.病毒核酸 |
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