Question

【題目】地下黑作坊用病死豬肉腌制的臘肉往往含有大量的細(xì)菌，可利用“熒光素——熒光素酶生物發(fā)光法”對(duì)市場(chǎng)中臘肉含細(xì)菌多少進(jìn)行檢測(cè)：

①將臘肉研磨后離心處理，取一定量上清液放入分光光度計(jì)（測(cè)定發(fā)光強(qiáng)度的儀器）反應(yīng)室內(nèi)，加入適量的熒光素和熒光素酶，在適宜條件下進(jìn)行反應(yīng)；

②記錄發(fā)光強(qiáng)度并計(jì)算ATP含量；

③測(cè)算出細(xì)菌數(shù)量。分析并回答下列問(wèn)題。

（1）熒光素接受________提供的能量后就被激活，在熒光素酶的作用下形成氧化熒光素并且發(fā)出熒光。根據(jù)發(fā)光強(qiáng)度可以計(jì)算出生物組織中ATP的含量，原因是發(fā)光強(qiáng)度與ATP含量成________（正比/反比）；根據(jù)ATP含量進(jìn)而測(cè)算出細(xì)菌數(shù)量的依據(jù)是：每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中ATP含量________。

（2）“熒光素——熒光素酶生物發(fā)光法”中涉及的能量轉(zhuǎn)換是________；生物細(xì)胞中ATP的水解一般與__________（吸能反應(yīng)或放能反應(yīng)）相聯(lián)系。

（3）研究人員用不同條件處理熒光素酶后，測(cè)定酶濃度與發(fā)光強(qiáng)度如圖所示。其中高濃度鹽溶液經(jīng)稀釋后酶活性可以恢復(fù)，高溫和Hg2＋處理后酶活性不可恢復(fù)。若要節(jié)省熒光素酶的用量，可以使用________處理；Hg2＋處理后酶活性降低可能是因?yàn)開__________。

Answer 1

【答案】（1）ATP 正比 大致相同且相對(duì)穩(wěn)定

（2）化學(xué)能→光能 吸能反應(yīng)

（3）Mg2＋ Hg2＋破壞了酶的空間結(jié)構(gòu)

【解析】（1）熒光素在熒光素酶和ATP等物質(zhì)的參與下可進(jìn)行反應(yīng)發(fā)出熒光。ATP是生命活動(dòng)能量的直接來(lái)源，發(fā)光強(qiáng)度與ATP的含量成正比，所以根據(jù)發(fā)光強(qiáng)度可以計(jì)算出生物組織中ATP的含量。每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中ATP含量大致相同且相對(duì)穩(wěn)定，故可根據(jù)ATP含量進(jìn)而測(cè)算出細(xì)菌數(shù)量。

（2）“熒光素--熒光素酶生物發(fā)光法”中涉及的能量轉(zhuǎn)換是化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽�；放能反�?yīng)一般與ATP的合成相聯(lián)系，吸能反應(yīng)一般與ATP的水解相聯(lián)系。

（3）因高濃度鹽溶液經(jīng)稀釋后酶活性可以恢復(fù)，高溫和Hg2+處理后酶活性不可恢復(fù)。故要節(jié)省熒光素酶的用量，可以使用Mg2+處理；Hg2+處理后酶活性降低可能是因?yàn)镠g2+破壞了酶的空間結(jié)構(gòu)使酶變性。