Question

【題目】Ag/TiO2作為一種常見的半導體光催化劑，在可見光照射下不僅可殺滅飲用水中的細菌等微生物，降解水中的有機化合物，還能循環(huán)利用，因此被廣泛使用。某研究小組制備了Ag/TiO2空心微球，現(xiàn)欲探究不同載銀量的AgTO2空心微球的殺菌性能。

（1）培養(yǎng)大腸桿菌：制備適宜大腸桿菌生長的培養(yǎng)基，將培養(yǎng)基等置于____________中滅菌20min；在無菌環(huán)境中倒平板，待平板冷凝后，將平板倒置，是為了_________和____________。將大腸桿菌制備成菌懸液，分離純化。

（2）殺菌性能檢測：挑取菌落制成菌懸液，用__________（工具）接種于無菌平板表面，使其均勻生長，布滿平板；用浸透了___________的小濾紙片（實驗組）和浸透了__________的小濾紙片（空白對照），分別放在涂好菌的平板的不同位置；將平板置于恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，觀察記錄濾紙片周圍的__________。

（3）測定飲用水所含的大腸桿菌數(shù)目，還有一種特別的方法：將已知體積的飲用水過濾后，將_____________放在加入____________的培養(yǎng)基上（大腸桿菌菌落呈黑色），根據(jù)黑色菌落的數(shù)目可計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌鍋 防止皿蓋上的冷凝水滴落，污染培養(yǎng)基 防止培養(yǎng)基水分過快蒸發(fā) 涂布器 不同載銀量的 Ag/TiO2空心微球懸濁液 無菌水 抑菌圈（透明圈）大小（直徑） 濾膜 伊紅美藍

【解析】

1、統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：（1）稀釋涂布平板法（間接），①當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌；②通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。（2）利用顯微鏡直接計數(shù)。

2、實驗室的滅菌方法有多種，不同的器具、物品應采用不同的滅菌方法。

3、鑒別培養(yǎng)基是用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入某種特殊的化學物質(zhì)，某種微生物在培養(yǎng)基中生長后能產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物，而這種代謝產(chǎn)物可以與培養(yǎng)基中的特殊化學物質(zhì)發(fā)生特定的化學反應，產(chǎn)生明顯的特征性變化，根據(jù)這種特征性變化，可將該種微生物與其他微生物區(qū)分開來。

（1）高壓蒸汽滅菌法的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌，制備適宜大腸桿菌生長的培養(yǎng)基用的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基均需要用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌20分鐘，以避免雜菌污染培養(yǎng)基。在無菌環(huán)境中倒平板，待平板冷凝后，將平板倒置，是為了防止皿蓋上的冷凝水滴落，污染培養(yǎng)基和防止培養(yǎng)基水分過快蒸發(fā)。

（2）殺菌性能檢測時應該在固體培養(yǎng)基上觀察菌落的數(shù)量，因此需要用稀釋涂布平板法分離大腸桿菌，操作時用涂布器接種于無菌平板表面，使其均勻生長，布滿平板。由于本實驗是探究不同載銀量的Ag/TiO，空心微球的殺菌性能，因此需要在培養(yǎng)基中加入空心微球，同時再做一個空白對照實驗，即用浸透了不同載銀量的Ag/TiO，空心微球懸濁液的小濾紙片（實驗組）和浸透了無菌水的小濾紙片（空白對照），分別放在涂好菌的平板的不同位置；將平板置于恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，觀察記錄濾紙片周圍抑菌圈（透明圈）大小（直徑）。

（3）測定飲用水所含的大腸桿菌數(shù)還可以用濾膜法。濾膜法的大致流程：用濾膜過濾待測水樣，這樣水樣中的細菌留在濾膜上，將濾膜放在加入伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)，統(tǒng)計黑色菌落數(shù)目。這種計數(shù)方法較實際值有誤差的原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此實際統(tǒng)計到的大腸桿菌數(shù)目偏少。