Question

【題目】磷是植物生長的重要營養(yǎng)元素之一，我國74%的耕地土壤中缺磷，而施入土壤的磷肥只有5%—25%的利用率，大部分磷都成了不能吸收的難溶性磷酸鹽。為了從土壤中篩選出能夠將難溶性磷酸鹽轉化為植物能吸收的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株，以便將其添加到有機肥中，改善植物磷元素供應。科研人員進行如下實驗：

實驗原理：固體培養(yǎng)基中難溶性磷酸鹽在微生物的作用下溶解，會在菌落周圍形成透明圈（如右圖），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

實驗步驟：

步驟1取某地區(qū)土樣5g制得土壤溶液后稀釋，取稀釋液lmL接種到基礎培養(yǎng)基A上，在適宜溫度下培養(yǎng)72h。

步驟2 在基礎培養(yǎng)基A上用接種環(huán)挑取代表性菌落再次接種，培養(yǎng)34d后觀察菌落特征和透明圈的大小，初步篩選出三種優(yōu)良解磷菌株（如右表）。

請分析回答下列問題：

（1）土壤中的磷以_______________形式被植物細胞吸收，吸收后可用于合成_______________ （填出

3種含磷的有機物）。

（2）實驗中所用的固體培養(yǎng)基往往是在液體培養(yǎng)基中加人凝固劑_______________制備的，培養(yǎng)基上出現(xiàn)的單一菌落可以看做一個_______________（填“種群”、“群落”、“生態(tài)系統(tǒng)”）。

（3）為了篩選出所需菌株，培養(yǎng)基中唯一的磷源應該是_______________，步驟1中接種方法是_______________，步驟2中接種環(huán)的滅菌方法是_______________。

（4）根據(jù)實驗結果可以確定溶解磷能力最強的菌株是_______________。為了保持所得菌種的純凈，需要進行菌種的保藏。臨時保藏時，要將菌種接種到試管的_______________ 格養(yǎng)基上，長成菌落后放人4℃的冰箱中；長期保存時可以采用_______________的方法。

Answer 1

【答案】

（1）PO43-（HPO42-或H2PO4-）（2分） 核酸、磷脂、ATP、NADPH等（3分。寫出任意三項即可）

（2）瓊脂 種群

（3）難溶性磷酸鹽（2分） 稀釋涂布平板法（2分） 灼燒滅菌

（4）乙 固體斜面 甘油管藏

【解析】

（1）P應是以磷酸鹽的方式被吸收的，即PO43-（HPO42-或H2PO4-）。吸收后可以用于合成磷脂、核酸、ATP、NADPH等。

（2）固體培養(yǎng)基需要在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂。培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落是位于同一區(qū)域內的同種生物的全部個體，所以是一個種群。但如果受到雜菌的污染后就是一個群落。

（3）因為是為了篩選吸收難溶性磷酸鹽的細菌，所以應以難溶性磷酸鹽為唯一的磷源。步驟1是稀釋涂布平板法，步驟2是中對接種環(huán)需要進行灼燒滅菌。

（4）溶解磷能力最強的應是乙，因為透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。臨時保藏可以接種到試管的固體鞋面培養(yǎng)基上，長期保存可以使用甘油管藏法進行保存。

土壤中分解尿素的細菌	分解纖維素的微生物
①選擇培養(yǎng)基的成分：尿素作為唯一的氮源 ②鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，pH升高，說明細菌能分解尿素	①選擇培養(yǎng)基的成分：纖維素作為唯一的碳源 ②鑒定方法：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈