Question

【題目】血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是目前發(fā)現(xiàn)的誘導(dǎo)腫瘤血管生成的最強烈的血鋅生成因子，針對VEGF生產(chǎn)的抗腫瘤藥物，是治療癌癥的一個方向；芝加哥大學(xué)的Katherine Knight博士成功地在轉(zhuǎn)基因兔中獲得骨髄瘤樣腫瘤，經(jīng)技術(shù)改進，能高產(chǎn)量地生產(chǎn)兔單克隆抗體：我國江蘇省某公司首次在全球成功開發(fā)出人源化兔單抗藥物“注射用人源化抗VEGF單克隆抗體”（SIM63）,有效打破了跨國公司的技術(shù)壟斷。人源化抗體可以大大減少異源抗體對人類機體造成的免疫副反應(yīng)。請回答下列相關(guān)問題：

（1）動物細(xì)胞在體外培養(yǎng)的技術(shù)屬于 工程，由于人們對動物細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)沒有完全搞淸楚，在使用合成培養(yǎng)基時，通常需要加入 等一些天然成分：在培養(yǎng)時除提供細(xì)胞所需的O2外，還需要CO2，其作用是 。

（2）在基因工程中，將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞現(xiàn)今極常用、極有效的方法是 ，要在短時間內(nèi)擴增大量的目的基因采用 技術(shù)，這個技術(shù)中的關(guān)鍵酶是 。

（3）當(dāng)VEGF作為抗原進入動物體內(nèi)時，動物體內(nèi)的某些B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞，這種漿細(xì)胞只分泌針對VEGF的一種抗體，但B細(xì)胞在體外培養(yǎng)不會無限增殖，解決這一問題的方法是通過動物細(xì)胞融合技術(shù)得到雜交瘤細(xì)胞，常用的化學(xué)誘導(dǎo)融合試劑為 ，要分離出雜交瘤細(xì)胞,應(yīng)該用 培養(yǎng)基進行篩選，單克隆抗體最主要的優(yōu)點是它的 ,并可大量制備。

Answer 1

【答案】

（1）動物細(xì)胞（1分） 血清（或血漿） 維持培養(yǎng)液的PH

（2）顯微注射 PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）（1分） Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）

（3）聚乙二醇（PEG） 選擇（1分） 特異性強、靈敏度高

【解析】

（1）動物細(xì)胞在體外培養(yǎng)的技術(shù)屬于動物細(xì)胞工程，由于人們對細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，故在使用合成培養(yǎng)基時，通常需加入血清、血漿等天然成分；氣體環(huán)境主要是提供細(xì)胞所需的O2和CO2，其中O2的作用是提供細(xì)胞進行有氧呼吸，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。

（2）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。要在短時間內(nèi)擴增大量的目的基因采用PCR技術(shù)，這個技術(shù)需要高溫使得DNA分子解旋，因此相關(guān)酶具有耐熱型，該技術(shù)用了關(guān)鍵酶為Taq酶。

（3）效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有化學(xué)法（聚乙二醇）、滅活的病毒（如仙臺病毒、滅活病毒）、和物理方法（電激、振動和離心）。通過選擇培養(yǎng)基可以對雜交瘤細(xì)胞進行篩選，單克隆抗體其特點是特異性強、靈敏度高。