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【題目】下圖為細胞融合的簡略過程,請據圖回答:

(1)若A、B是動物細胞,通常用_______處理獲得分散的單個細胞。A、B到C的過程中,常用的不同于植物細胞融合的手段是_______

(2)若該圖是生產抗甲型流感病毒的單克隆抗體的制備過程。A為從小鼠體內獲取的____,在獲得此細胞之前,小鼠需注射______,圖中B細胞是小鼠骨髓瘤細胞,符合要求的D細胞具有的特點是_________。

(3)若A、B是植物細胞,則之前已用_________去除了細胞壁。常用來誘導細胞融合的化學試劑是________。

(4)若A是番茄原生質體,B為馬鈴薯原生質體,D要再生出_______。通過植物組織培養(yǎng)技術把D培養(yǎng)成雜種植株,D個體______(填“可育”或“不育”)。這種育種方式的優(yōu)點是__________________________________。

【答案】胰蛋白酶 滅活的病毒誘導 漿細胞 滅活甲流病毒 既能分泌抗甲流病毒抗體又能無限增殖 纖維素酶、果膠酶(酶解法) 聚乙二醇(PEG) 細胞壁 可育 按照人們的意愿改變了生物的遺傳物質,克服了遠緣雜交不親和的障礙

【解析】

植物體細胞雜交過程,先去壁獲得原生質體,然后利用物理法(離心、振動、電擊)或化學法(聚乙二醇)誘導原生質體融合,融合完成的標志是形成新的細胞壁。由于原生質體融合時,有同種和異種融合,所以融合后需進行鑒定,然后再通過植物組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成雜種植株,雜種植株細胞中染色體組成是兩融合細胞中染色體之和,是否可育須根據雜種細胞中是否有同源染色體判斷。單克隆抗體由雜交瘤細胞合成并分泌,雜交瘤細胞由已免疫的B淋巴細胞(漿細胞)和骨髓瘤細胞誘導融合形成,雜交瘤細胞具有既能產生特異性抗體又能無限增殖的能力。

1)若AB是動物細胞,常用胰蛋白酶處理獲得分散的單個細胞。A、BC的過程中,動物細胞融合常用的誘導方法是滅活的病毒。

2)若該圖是生產抗甲型流感病毒的單克隆抗體的制備過程,則小鼠需注射滅活甲流病毒,A為從小鼠體內獲取的漿細胞,圖中B細胞是小鼠骨髓瘤細胞,符合要求的D雜交瘤細胞既能分泌抗甲流病毒抗體又能無限增殖。

3)若A、B是植物細胞,則之前用纖維素酶、果膠酶(酶解法)去除了細胞壁,制備原生質體,常用聚乙二醇來誘導細胞融合。

4)若A是番茄原生質體,B為馬鈴薯原生質體,D要再生出細胞壁。通過植物組織培養(yǎng)技術把D培養(yǎng)成雜種植株,A、B分別是番茄原生質體和馬鈴薯原生質體,均含兩個染色體組,所以D細胞含四個染色體組,由D培養(yǎng)成的雜種植株細胞中含有同源染色體,是可育的。這種育種方式的優(yōu)點是可以按照人們的意愿改變了生物的遺傳物質,克服了遠緣雜交不親和的障礙。

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【題目】他莫昔芬(Tamoxifen)是治療乳腺癌的常用藥物,然而長期服用容易引起耐藥性。牛樟芝(AC)是一種傳統(tǒng)的藥用蘑菇提取物,科研人員用AC處理Tamoxifen抗性的乳腺癌細胞(MCF-7tamR),發(fā)現其可以緩解Tamoxifen的耐藥性,相關研究如下,請回答問題:

(1)乳腺癌發(fā)生的根本原因是外界致癌因子引起了________突變。

(2)科研人員在不同條件下培養(yǎng)MCF-7tamR細胞,分別于24h、48h測定細胞增長率,結果如圖1所示。

①體外培養(yǎng)MCF-7tamR細胞時,培養(yǎng)基中除水、糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、促生長因子外,通常還需要加入______和抗生素;傳代培養(yǎng)時,貼滿瓶壁的細胞需要用_____等處理后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

②分析圖1結果,依據__________,可知AC和Tamoxifen聯(lián)合使用對于MCF-7tamR細胞的治療效果最好。

(3)Skp2和RhoA是乳腺癌細胞中兩種關鍵酶,前者抑制細胞凋亡,后者影響細胞代謝。兩種酶是基因通過___________過程指導合成的蛋白質。

(4)為進一步探明AC的作用機理,研究人員從100μg/ml AC處理24h的MCF-7tamR細胞中獲取mRNA,逆轉錄得到cDNA后,特異性擴增skp2和RhoA基因的片段,進行電泳檢測。結果如圖2所示。

①β-actin基因在不同細胞中轉錄水平相對穩(wěn)定,且表達量較高,在實驗中可消除______等無關變量對實驗結果的影響,常用作參照基因。

②由實驗結果可知,AC抑制了細胞中Skp2、RhoA基因的_______過程。據此推測AC的作用機制可能是__________

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