Question

玉米中賴氨酸的含量較低，原因是賴氨酸合成過程中，天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的活性受細胞內(nèi)賴氨酸濃度的影響．為此，有人通過基因修飾或合成，獲得賴氨酸高產(chǎn)的玉米．請回答：
（1）將改造后的基因在體外大量擴增，常用的方法是

 

．在基因改造后，構(gòu)建基因表達載體時需要用到的2種工具酶是

 

、

 

．
（2）將改造后的基因?qū)�入玉米時，常用

 

法，它與常見的雙子葉植物的導入方法不同．一般情況下，導入目的基因后，是否可以穩(wěn)定表達其遺傳特性，還需要進行檢測與鑒定，檢測對象是

 

，有時還要進行個體生物學水平的鑒定．
（3）進行上述基因改造后的玉米體細胞，再通過

 

技術(shù)得到高產(chǎn)賴氨酸的玉米植株．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
將目的基因?qū)�入植物細胞�?br />（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是用這種方法獲得的）
①農(nóng)桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上．
②轉(zhuǎn)化：目的基因插人Ti質(zhì)粒的T-DNA上 農(nóng)桿菌→導入植物細胞→目的基因整合到植物細胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達．
（2）基因槍法：是單子葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法，但是成本較高．
（3）花粉管通道法：這是我國科學家獨創(chuàng)的一種方法，是一種十分簡便經(jīng)濟的方法．
（我的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉就是用此種方法獲得的）

解答： 解：（1）擴增目的基因常用的方法是PCR技術(shù)．在基因改造后，構(gòu)建基因表達載體時，首先需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和運載體，再利用DNA連接酶將兩者連接成重組質(zhì)粒．
（2）在目的基因?qū)�入受體細胞時，雙子葉植物一般利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，單子葉植物一般運用基因槍法．玉米屬于單子葉植物，因此一般常用基因槍法將改造后的基因?qū)�入玉米．目的基因的檢測與鑒定包括分子水平上的檢測和個體水平上的鑒定定．
（3）進行上述基因改造后的玉米體細胞，再通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)得到高產(chǎn)賴氨酸的玉米植株．
故答案為：
（1）PCR技術(shù)    限制性核酸內(nèi)切酶    DNA連接酶
（2）基因槍法    目的基因表達出的蛋白質(zhì)
（3）植物組織培養(yǎng)

點評：本題考查了基因工程的有關(guān)知識，要求考生能夠識記基因工程的操作工具；掌握目的基因?qū)�入受體細胞的方法，特別是單子葉植物和雙子葉植物的區(qū)別，再結(jié)合所學知識準確解題．