Question

18．將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)�入棉花�?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過程如圖所示（注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)拉上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中）．
（1）過程①需用同種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切．為將過程

②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來，應(yīng)使用含有卡那霉素物質(zhì)的選擇性培養(yǎng)基．
（2）過程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，目的是讓T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞并將其插入到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)．
（3）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，在個(gè)體水平上常用的方法是投放棉鈴蟲．種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥的使用，以減輕環(huán)境污染．
（4）若過程④僅獲得大量的根，則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加細(xì)胞分裂素濃度激素以獲得芽；部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長(zhǎng)根，原因是頂芽端合成的生長(zhǎng)素向基部運(yùn)輸，促進(jìn)根的分化．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育過程圖，主要包括：①基因表達(dá)載體的構(gòu)建；②將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）；③將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，并脫分化形成愈傷組織，④再分化，將離體棉花植株培育成抗蟲棉還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．

解答 解：（1）過程①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要同種限制酶對(duì)含有Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切．圖解中看出，質(zhì)粒上的標(biāo)記基因?yàn)榭�那霉素抗性基因，因此為將過程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來，應(yīng)使用含卡那霉素的選擇培養(yǎng)基．
（2）過程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，目的是讓T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞并將其插入到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)．
（3）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲，若棉鈴蟲大量死亡，說明轉(zhuǎn)基因成功．種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥的使用，以減輕環(huán)境污染．
（4）過程④中在培養(yǎng)基中增加細(xì)胞分裂素濃度可以獲得大量的芽；同時(shí)芽頂端合成的生長(zhǎng)素向基部運(yùn)輸，促進(jìn)根的分化．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切　　卡那霉素 
（2）T-DNA　染色體 
（3）投放棉鈴蟲　　農(nóng)藥
（4）細(xì)胞分裂素濃度　　頂芽端合成的生長(zhǎng)素向基部運(yùn)輸，促進(jìn)根的分化

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合抗蟲棉的培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)、基因分離定律的實(shí)質(zhì)及應(yīng)用，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具、操作步驟和應(yīng)用．