Question

3．乳酸鏈球菌素（Nisin）是一種比較安全的生物型防腐劑，在人體的消化道內(nèi)可被蛋白酶降解，并不會(huì)像抗生素那樣改變碭道正常菌群，因此應(yīng)用比較廣泛．某興趣小組擬驗(yàn)證Nisin對(duì)小鼠腸道菌群沒(méi)有參響，進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)．
（1）實(shí)驗(yàn)步驟：
①選取狀況良好、年齡和體重近似的小鼠20只，隨機(jī)均分為A、B兩組；
②A組小鼠用含1.0%Nisin的食物連續(xù)飼喂12周；B組小鼠用用等量不含1.0%Nisin的同種食物連續(xù)飼喂12周作為對(duì)照，其他情況相同；
③搜集A、B組小鼠糞便制成懸浮液分別涂布于上c（填下列選項(xiàng)前的字母）；
a．全營(yíng)養(yǎng)液體培養(yǎng)基b．以Nisin為碳源的液體培養(yǎng)基
c．全營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基d．以Nisin為碳源的固體培養(yǎng)基．
④接種后置于無(wú)氧（填“有氧”或“無(wú)氧”）條件下培養(yǎng)，通過(guò)觀察，以初步鑒定小鼠消化道中的微生物類群；
⑤統(tǒng)計(jì)比較兩組微生物類群的種類和數(shù)量，以驗(yàn)證結(jié)論．
請(qǐng)根據(jù)以上步驟回答下列問(wèn)題：
①在制作培養(yǎng)基時(shí)要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH的要求，調(diào)pH應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之前 （填“前”或“后”）．
②若菌群中含有大腸桿菌，可在培養(yǎng)基中添加 制成鑒別培養(yǎng)基，可根據(jù)培養(yǎng)基中黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出腸道中大腸桿菌的數(shù)量．除上述計(jì)數(shù)法外，還可以利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接觀察統(tǒng)計(jì)菌體的數(shù)量．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、探究實(shí)驗(yàn)需要遵循對(duì)照原則和單一變量原則．該實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證Nisin對(duì)小鼠腸道菌群沒(méi)有影響，因此A組小鼠用含1.0%Nisin的食物連續(xù)飼喂12周；B組小鼠用 用等量不含1.0%Nisin的同種食物連續(xù)飼喂12周作為對(duì)照，通過(guò)觀察菌落的特征來(lái)統(tǒng)計(jì)比較微生物的數(shù)量及比例．

解答 解：（1）②實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖恰膀?yàn)證Nisin對(duì)小鼠腸道菌群沒(méi)有影響”，因此實(shí)驗(yàn)的自變量為“是否添加Nisin”，則A組小鼠用含1.0%Nisin的食物連續(xù)飼喂12周；B組小鼠用用等量不含1.0%Nisin的同種食物連續(xù)飼喂12周作為對(duì)照，其他情況相同．
③該實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證Nisin對(duì)小鼠腸道菌群沒(méi)有影響，而不是篩選出某種微生物，因此搜集A和B組（實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組）小鼠糞便制成懸浮液涂布于全營(yíng)養(yǎng)的固體培養(yǎng)基上．
④腸道菌群生活在缺氧的環(huán)境中，因此接種后應(yīng)該置于無(wú)氧條件下培養(yǎng)，通過(guò)觀察菌落的特征以初步鑒定小鼠消化道中的微生物類群．
（2）①制備培養(yǎng)基的步驟為：計(jì)算、稱量、融合、調(diào)pH、滅菌和倒平板．
②若菌群中含有大腸桿菌，可在培養(yǎng)基中添加伊紅美藍(lán)制成鑒別培養(yǎng)基，可根據(jù)培養(yǎng)基中黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出腸道中大腸桿菌的數(shù)量．除上述計(jì)數(shù)法外，還可以利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接觀察統(tǒng)計(jì)菌體的數(shù)量．．
故答案為：
（1）②用等量不含1.0%Nisin的同種食物     ③c     ④無(wú)氧       菌落的特征（大小、顏色、形狀和隆起程度等方面）
（2）①前     ②伊紅美藍(lán)     黑     血細(xì)胞計(jì)數(shù)板

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、種類及功能；識(shí)記接種微生物常用的兩種方法及注意事項(xiàng)，能根據(jù)題干實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐晟茖?shí)驗(yàn)步驟，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．