【題目】研究人員成功地從土壤中篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。請就“如何從土壤中獲得纖維素分解菌”回答以下問題:

(1)纖維素酶是一種復合酶,一般認為它至少包括三種組分,即C1酶、CX酶和_____________ 酶。

(2)若獲得純凈的菌株,常采用平板劃線法進行接種,此過程所用的接種工具是__________,對該接種工具采用_________滅菌的方法。

(3)剛果紅可以與纖維素等多糖形成紅色復合物,但并不與____________發(fā)生這種反應。常用的剛果紅染色法有兩種:第一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進行顏色反應;第二種是在倒平板時就加入剛果紅。______(填“第一種”或“第二種”)方法會使菌落之間發(fā)生混雜。

(4)如果觀察到產(chǎn)生________的菌落,說明可能獲得了纖維素分解菌。為了確定是纖維素分解菌,還需要進行______________________的實驗。

【答案】葡萄糖苷 接種環(huán) 灼燒 纖維二糖 葡萄糖 第一種 透明圈 發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶

【解析】

土壤中存在著大量纖維素分解酶,包括真菌、細菌和放線菌等,它們可以產(chǎn)生纖維素酶;

纖維素酶是一種復合酶,可以把纖維素分解為纖維二糖,進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用;

在培養(yǎng)基中加入剛果紅,可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物,當纖維素被分解后,紅色復合物不能形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,從而可篩選纖維素分解菌。

1)纖維素酶是一種復合酶,一般認為它至少包括三種組分,即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。

2)若獲得純凈的菌株,常采用平板劃線的方法進行接種,此過程所用的接種工具是接種環(huán),操作時采用灼燒滅菌的方法。

3)剛果紅可以與纖維素等多糖形成紅色復合物,但并不與纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。常用的剛果紅染色法有兩種:第一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進行顏色反應;第二種是在倒平板時就加入剛果紅。第一種方法會使菌落之間發(fā)生混雜。第二種方法:產(chǎn)生淀粉酶的微生物也產(chǎn)生模糊的透明圈,有些微生物能降解色素,形成明顯的透明圈,故兩種方法各有缺點。

4)剛果紅與纖維素反應呈紅色,纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶會將纖維素分解而不能與剛果紅染液呈紅色,在菌落周圍會出現(xiàn)透明圈。為了確定是纖維素分解菌,還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗。纖維素酶的測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量的測定。

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