Question

3．基因敲除是應用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術．通常意義上的基因敲除主要是應用DNA重組原理，用設計好的DNA片段替代動物細胞內(nèi)的基因片段，從而達到基因敲除的目的．運用基因重組進行基因敲除是構建基因敲除動物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如圖所示．

請回答下列問題：
（1）在把與靶基因序列同源的目的基因導入受體細胞前，應選擇一個合適的運載體與之結合，形成的DNA分子稱為基因表達載體，在這個過程中所需的工具酶有限制酶和DNA連接酶．
（2）如果要獲得一只含目的基因的小鼠，則選擇的受體細胞應該是受精卵．
（3）上述過程實現(xiàn)的重組類似于減數(shù)分裂第一次分裂后期的自由組合現(xiàn)象．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的操作步驟：①目的基因的獲��；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．因此，在把與靶基因序列同源的目的基因導入受體細胞前，應選擇一個合適的運載體與之結合，形成的DNA分子稱為基因表達載體．該過程需要用到限制酶和DNA連接酶．
（2）受精卵的全能性最高，因此要獲得一只含目的基因的小鼠，常選擇受精卵作為受體細胞，因為受精卵的全能性最高．
（3）基因工程的原理為基因重組，該重組類似于減數(shù)第一次分裂后期的自由組合現(xiàn)象．
故答案為：
（1）基因表達載體     限制酶      DNA連接酶
（2）受精卵
（3）第一次分裂后     自由組合

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關細節(jié)，同時了解基因工程技術的相關應用，能結合所學的知識準確答題．