10．人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得，生產(chǎn)流程如圖所示．有關(guān)敘述正確的是（　�。�
A．構(gòu)建重組表達(dá)載體是需要用DNA聚合酶和DNA連接酶
B．檢測(cè)目的基因是否已轉(zhuǎn)錄出mRNA，可采用分子雜交技術(shù)
C．將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵之前用CaCl 2 處理，有利于提高轉(zhuǎn)化效率
D．若在母羊的體細(xì)胞中檢測(cè)到htPA基因，說(shuō)明目的基因成功表達(dá)

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、構(gòu)建基因表達(dá)載體需要限制酶和DNA連接酶，不需要DNA聚合酶，A錯(cuò)誤；
B、檢測(cè)目的基因是否已轉(zhuǎn)錄出mRNA，可采用分子雜交技術(shù)，B正確；
C、將目的導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞時(shí)需要用CaCl 2 處理，C錯(cuò)誤；
D、若在母羊的體細(xì)胞中檢測(cè)到htPA基因，說(shuō)明目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說(shuō)明目的基因成功表達(dá)，D錯(cuò)誤．
故選：B．

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合轉(zhuǎn)htPA基因母羊的培育過(guò)程圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源：2015-2016學(xué)年廣東深圳高級(jí)中學(xué)高一下期中考試生物卷（解析版） 題型：選擇題

將一株植物置于密閉鐘罩內(nèi)，在某光照強(qiáng)度下，測(cè)得密閉鐘罩內(nèi)CO2變化量為零（不考慮微生物的細(xì)胞呼吸)。由此不能說(shuō)明的是

A.植物光合作用消耗的CO2與呼吸作用產(chǎn)生的CO2相等

B.葉肉細(xì)胞呼吸作用消耗的O2與光合作用產(chǎn)生的O2量相等

C.若是農(nóng)田中的作物處于該光照強(qiáng)度下不能生長(zhǎng)

D.葉肉細(xì)胞從密閉鐘罩內(nèi)吸收了CO2

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

3．下列現(xiàn)象中屬于需要氧呼吸所特有的是（　�。�
A．有二氧化碳生成B．有水的生成C．有丙酮酸的生成D．檸檬酸循環(huán)

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

20．研究顯示，RNA在基因表達(dá)調(diào)控中扮演著重要角色．近期，德國(guó)科學(xué)家在《Science》雜志發(fā)表論文稱，他們以馬鈴薯甲蟲生長(zhǎng)所必需的β-肌動(dòng)蛋白基因作為目的基因，將特異的雙鏈RNA（dsRNA，長(zhǎng)度大于60個(gè)堿基對(duì)）轉(zhuǎn)入馬鈴薯的葉綠體，如圖所示，用這種馬鈴薯葉片喂食的甲蟲幼蟲5天后全部死亡；但將同樣的dsRNA轉(zhuǎn)入馬鈴薯的核基因組，則完全不能使馬鈴薯有抗蟲效果．請(qǐng)回答．

（1）通常細(xì)胞中的RNA以單鏈形式存在，如作為翻譯模板的mRNA；細(xì)胞中除葉綠體外，含有核酸的細(xì)胞器還包括線粒體、核糖體；dsRNA的堿基互補(bǔ)配對(duì)方式為鳥嘌呤-胞嘧啶、腺嘌呤-尿嘧啶（寫中文名稱）．
（2）據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)入馬鈴薯細(xì)胞核DNA的dsRNA會(huì)被植物細(xì)胞內(nèi)的核酸酶切割成小片段的siRNA，但其進(jìn)入甲蟲腸道后不能被吸收；葉綠體中不存在（存在/不存在）核酸酶，轉(zhuǎn)入葉綠體DNA的dsRNA能夠進(jìn)入甲蟲腸道并被吸收，再被甲蟲細(xì)胞中的核酸酶切割．
（3）資料顯示，siRNA能降解已合成的目的基因的mRNA，從而抑制基因的表達(dá)，此類干擾屬于轉(zhuǎn)錄后（轉(zhuǎn)錄前/轉(zhuǎn)錄后）水平引發(fā)的基因沉默．本研究中，siRNA可引發(fā)β-肌動(dòng)蛋白基因沉默，最終使甲蟲死亡．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

6．利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素，需要構(gòu)建一種能高水平表達(dá)的基因表達(dá)載體，選擇合適的基因啟動(dòng)子至關(guān)重要．由于無(wú)法由基因表達(dá)產(chǎn)物推知啟動(dòng)子的堿基序列，運(yùn)用PCR技術(shù)單獨(dú)克隆啟動(dòng)子存在困難．科研人員經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期研究，終于發(fā)明了如圖所示的一種克隆啟動(dòng)子的方法．請(qǐng)分析回答：

（1）培育轉(zhuǎn)基因奶牛時(shí)，需要在生長(zhǎng)激素基因編碼序列前插入乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子；構(gòu)建的基因表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物受精卵常用顯微注射技術(shù)．
（2）由基因表達(dá)產(chǎn)物無(wú)法推知啟動(dòng)子堿基序列，其原因是基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄．
（3）過(guò)程①需選擇的限制酶是BamHⅠ，過(guò)程③需選擇的限制酶是HindⅢ．過(guò)程④需要使用的工具酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（4）過(guò)程④中可以根據(jù)編碼序列兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增．運(yùn)用PCR擴(kuò)增DNA片段的原理是DNA雙鏈復(fù)制．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

15．下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過(guò)程和克隆羊培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）制備單克隆抗體的技術(shù)屬于生物技術(shù)的動(dòng)物細(xì)胞工程．圖中①是向動(dòng)物體內(nèi)注射抗原后而獲得的．
（2）②過(guò)程常在聚乙二醇（滅活的病毒、電刺激等）誘導(dǎo)下完成，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高．單克隆抗體能定向攻擊癌細(xì)胞，主要是利用其特異性．
（3）若B淋巴細(xì)胞的基因型為HH，骨髓瘤細(xì)胞的基因型為SS，經(jīng)過(guò)②過(guò)程則后細(xì)胞類型有5種．由選擇培養(yǎng)基篩選出來(lái)的細(xì)胞基因型是HHSS．
（4）克隆羊的性別由哪只羊決定白面綿羊，其生殖方式是無(wú)性繁殖．
（5）在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，將動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般控制在10代以內(nèi)．當(dāng)出現(xiàn)接觸抑制后，常常需要分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，這時(shí)需要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）酶將貼壁細(xì)胞分離開．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

2．下列敘述錯(cuò)誤的是（　�。�
A．右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞，為避免污染需放在酒精燈火焰附近
B．倒平板整個(gè)過(guò)程應(yīng)在火焰旁進(jìn)行
C．打開培養(yǎng)皿蓋，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋
D．為避免水滴滴入培養(yǎng)基，平板應(yīng)倒過(guò)來(lái)放置

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

19．光合作用的過(guò)程包括光反應(yīng)和暗反應(yīng)．光反應(yīng)能夠?yàn)榘捣磻?yīng)提供的物質(zhì)是（　�。�
A．O2和C3化合物B．C5化合物C．H2O和O2D．[H]和ATP

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

20．關(guān)于性染色體的不正確敘述是（　　）
A．生物體細(xì)胞內(nèi)的兩條性染色體，是一對(duì)同源染色體
B．XY型的生物體細(xì)胞如果含兩條同型性染色體，可記作XX
C．XY型的生物體細(xì)胞內(nèi)含有兩條異型性染色體
D．性染色體上的基因在遺傳時(shí)與性別相聯(lián)系

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