Question

8．人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，研究者將獲取的人htPA基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入到羊的受精卵中，再通過一系列早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)獲得轉(zhuǎn)htPA基因母羊，該轉(zhuǎn)基因羊的羊乳中可獲得研究所需的藥用蛋白．請結(jié)合所學(xué)知識回答下列問題：
（1）以人的基因組DNA作模板，利用引物在體外復(fù)制htPA基因的技術(shù)被稱為PCR技術(shù)，用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割htPA基因與載體后，用DNA連接酶連接，可以構(gòu)建基因表達(dá)載體．檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA中，可采用DNA分子雜交（或核酸探針）技術(shù)．
（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能（處理），才具備受精能力．
（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是顯微注射法．為了獲得更多母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定（或胚胎檢查）．利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體，分割胚胎時要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割．
（4）若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達(dá)．
（5）這種通過分泌乳汁生產(chǎn)藥用蛋白的轉(zhuǎn)基因羊被稱為乳腺（或乳房）生物反應(yīng)器．

Answer 1

分析 DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．
目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
該基因工程需要對羊的性別進(jìn)行選擇，由于只有母羊能夠分泌乳汁，因此選擇母羊的胚胎進(jìn)行移植．

解答 解：（1）體外擴(kuò)增基因常用PCR技術(shù)，htPA基因與載體需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體．檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用DNA分子雜交（或核酸探針）技術(shù)．
（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能（處理），才具備受精能力．
（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是顯微注射法．為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定，以選擇母羊的胚胎進(jìn)行移植．利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的全能性，分割胚胎時要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割．
（4）若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達(dá)．
（5）這種通過分泌乳汁生產(chǎn)藥用蛋白的轉(zhuǎn)基因羊被稱為乳腺（或乳房）生物反應(yīng)器．
故答案為：
（1）PCR  同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）    DNA分子雜交（或核酸探針）
（2）促性腺激素    獲能（處理）
（3）顯微注射法    性別鑒定（或胚胎檢查）    內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）
（5）乳腺（或乳房）生物反應(yīng)器

點(diǎn)評 本題考查了基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟；明確該基因工程中需要選擇母羊進(jìn)行胚胎移植；識記細(xì)胞全能性的概念等．要求考生具有扎實的基礎(chǔ)知識，難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的考查．