Question

)運(yùn)用動(dòng)物體細(xì)胞雜交技術(shù)可實(shí)現(xiàn)基因定位。研究發(fā)現(xiàn)：

用人體細(xì)胞與小鼠體細(xì)胞進(jìn)行雜交得到的雜種細(xì)胞含有雙方的染

色體。雜種細(xì)胞在持續(xù)分裂過程中保留鼠的染色體而人類染色體則

會(huì)逐漸丟失，最后只剩一條或幾條。右圖表示人的缺乏HGPRT酶突

變細(xì)胞株(HGPRT-)和小鼠的缺乏TK酶細(xì)胞株(TK-)融合  后并在HAT

培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程，結(jié)果表明最終人的染色體在融合細(xì)胞中僅存有

3號(hào)染色體或17號(hào)染色體或兩者都有。已知只有同時(shí)具有HGPRT

酶和TK酶的融合細(xì)胞才可在HAT培養(yǎng)液中長期存活與繁殖。

(1)體細(xì)胞雜交克服了            ，過程①常用的生物方法是

              。

(2)過程②中，為了防止細(xì)菌的污染，所用培養(yǎng)液應(yīng)該添加一定量的      ，

  此外還要定期用         處理細(xì)胞，使貼壁生長的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸液。

(3)從培養(yǎng)過程看，HAT培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料，還起              作用。

(4)從圖示結(jié)果看，可以確定人的          基因位于            號(hào)染色體；該方法可以對(duì)鼠基因定位嗎？                                                                 。

Answer 1

(1)遠(yuǎn)源雜交不親和（或生殖隔離）的障礙（1分）   用滅活的（仙臺(tái)／動(dòng)物）病毒誘導(dǎo)融合(1分)

   (2)抗生素(1分） 胰蛋白酶（1分） (3)選擇(篩選)(1分)  (4) TK酶（2分）  17(2分)  不能（2分）

解析:

（1）體細(xì)胞雜交克服的是遠(yuǎn)源雜交不親和（生殖隔離）的障礙。動(dòng)物細(xì)胞融合常用滅活的動(dòng)物病毒實(shí)現(xiàn)兩動(dòng)物細(xì)胞的融合。

（2）抗生素能夠抑制細(xì)菌的生長與繁殖。培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞每隔一段時(shí)間要用胰蛋白酶處理，使貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞分散、防止出現(xiàn)接觸抑制。

（3）根據(jù)只有同時(shí)具有HGPRT酶和TK酶的融合細(xì)胞才可在HAT培養(yǎng)液中長期存活與繁殖可知，HAT培養(yǎng)基既能為培養(yǎng)的細(xì)胞提供營養(yǎng)，又能起到選擇（篩選）作用。

（4）融合細(xì)胞只含人的3號(hào)染色體不能存活，說明人的3號(hào)染色體上不含TK酶基因；融合細(xì)胞在含人的3號(hào)和7號(hào)染色體或只含人的7號(hào)染色體時(shí)就可以存活，說明人的7號(hào)染色體上含TK酶基因。

     由于融合細(xì)胞具有鼠細(xì)胞的2個(gè)染色體組，不能確定TK基因在哪條染色體上，故不能用該方法對(duì)鼠基因定位。