Question

【題目】[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題]（15分）

將乙肝病毒表面抗原基因?qū)�入草莓�?xì)胞中，由此可獲得用來(lái)預(yù)防乙肝的一種新型疫苗，為預(yù)防乙肝開(kāi)辟了一條新途徑。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）獲得乙肝病毒表面抗原基因后，常利用_________________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。把基因轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌內(nèi)時(shí)常用_________________處理農(nóng)桿菌，使之成為感受態(tài)細(xì)胞。

（2）使用農(nóng)桿菌將乙肝病毒表面抗原基因?qū)�入草莓�?xì)胞中，農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可將乙肝病毒表面抗原基因轉(zhuǎn)移至草莓細(xì)胞中的_________________上。目的基因進(jìn)入草莓細(xì)胞內(nèi)并在草莓細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)，這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)________________。

（3）在基因工程操作過(guò)程中，需要用_________________酶和_________________酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，基因表達(dá)載體要有_________________，以便篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。

（4）在分子水平上，可采用_______________的方法來(lái)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因草莓果實(shí)提取液中有無(wú)相應(yīng)的抗原。

Answer 1

【答案】（15分，除標(biāo)明外，每空2分）

（1）PCR（1分） CaCl2（Ca2+）

（2）染色體DNA 轉(zhuǎn)化

（3）限制 DNA連接 標(biāo)記基因

（4）抗原—抗體雜交

【解析】（1）常利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。將目的基因?qū)�入農(nóng)桿菌時(shí)，常用CaCl2（Ca2+）處理農(nóng)桿菌，使之成為易于吸收周?chē)�環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞，有利于重組質(zhì)粒進(jìn)入農(nóng)桿菌。（2）使用農(nóng)桿菌將目的基因?qū)�入草莓�?xì)胞中，農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可將目的基因轉(zhuǎn)移至草莓細(xì)胞的染色體DNA上。目的基因進(jìn)入草莓細(xì)胞內(nèi)，并在草莓細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)，該過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化。（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要用限制酶對(duì)目的基因和載體分別進(jìn)行切割，然后用DNA連接酶將其連接起來(lái)。基因表達(dá)載體上要有標(biāo)記基因，以便篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。（4）要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因草莓果實(shí)提取液中有無(wú)相應(yīng)的抗原，可采用抗原—抗體雜交法。