Question

（14分）回答有關(guān)生物工程的問題：
（1）構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí)，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生__末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接，則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生_（相同不同）粘性末端的限制酶。
（2）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等，其中啟動(dòng)子的作用是提供________特異性識(shí)別結(jié)合位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，常用___處理大腸桿菌，以利于表達(dá)載體進(jìn)入：為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與__________雜交，該雜交技術(shù)稱為_________。
（3）如果要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的______中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過DNA重組將_____插入植物細(xì)胞的染色體___上。
(4)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。
(5)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
(6)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

Answer 1

⑴相互接觸  接觸抑制   單層（或一層）  胰蛋白酶
⑵衰老甚至死亡  不死性   降低    減少
⑶由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色（或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色）
⑷中    ⑸冷凍（或超低溫、液氮）   酶         ⑹抗原

解析