【題目】下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題:

1若圖2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因,現(xiàn)在要培養(yǎng)乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊,研究者需將該基因通過 方法注入到羊的 中,則發(fā)育成的羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。這一過程涉及到以下哪些過程多選 。

ADNA自我復(fù)制BDNA以其一條鏈為模板合成RNA

CRNA自我復(fù)制D按照RNA上密碼子的排列順序合成蛋白質(zhì)

2若圖2中目的基因D需要同時使用Met和Pst才能獲得,而圖1所示的質(zhì)粒無相應(yīng)的限制酶酶切位點。所以在該質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒時,需要對質(zhì)粒改造,構(gòu)建新的限制酶酶切位點。試幫助完成構(gòu)建需要的限制酶酶切位點的思路選填-

EcoRⅠ②MetⅠ③PstⅠ④DNA連接酶DNA聚合酶

首先用 處理質(zhì)粒;然后用 處理質(zhì)粒,使被切開的質(zhì)粒末端連接上相應(yīng)的脫氧核苷酸;再用 處理質(zhì)粒,形成了的限制酶酶切割位點,它可被識別。

3檢測篩選是一個重要步驟。圖3表示在一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種方法與培養(yǎng)方法,以檢測基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入大腸桿菌。培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外,培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有 。從篩選結(jié)果分析,含目的基因的是 填編號菌落中的細(xì)菌。

DNA分子中,一條鏈的兩個核苷酸通過 連接。如要檢測目的基因是否成功表達(dá),須提取培養(yǎng)后大腸桿菌解的 ,用相應(yīng)抗體檢測。

【答案】

1顯微注射 受精卵 ABD

2①⑤④②

3四環(huán)素和青霉素 4、6

4磷酸二酯鍵 總蛋白

【解析】

1基因工程中,一般采取顯微注射法將含有目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵細(xì)胞中,然后將該受精卵發(fā)育成具有目的基因的個體。在受精卵發(fā)育成個體的過程中涉及到細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化,會發(fā)生DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄形成RNA,翻譯成蛋白質(zhì),但是不會發(fā)生RNA的復(fù)制,故選ABD。

2根據(jù)題干信息和圖像分析,對質(zhì)粒改造,構(gòu)建新的限制酶酶切位點時,首先用EcoR處理質(zhì)粒;然后用DNA聚合酶處理質(zhì)粒,使被切開的質(zhì)粒末端連接上相應(yīng)的脫氧核苷酸;再用DNA連接酶處理質(zhì)粒,形成了的限制酶酶切割位點,它可被Met識別。

3培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外,培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有四環(huán)素和青霉素。從圖3篩選結(jié)果分析,培養(yǎng)基B中少了4、6菌落,所以含目的基因的是4、6菌落中的細(xì)菌。

4DNA分子中,一條鏈的兩個核苷酸之間是通過磷酸二酯鍵連接的。如要檢測目的基因是否成功表達(dá),須提取培養(yǎng)后大腸桿菌解的總蛋白,用相應(yīng)抗體檢測。

練習(xí)冊系列答案
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A.甲中的a、乙中的BA時細(xì)胞正在進(jìn)行DNA復(fù)制

B.圖中的b、乙中的AB時細(xì)胞會出現(xiàn)染色體數(shù)目加倍的時期

C.甲、乙中會發(fā)生同源染色體的分離,非同源染色體的自由組合

D.根據(jù)在細(xì)胞周期中阻斷DNA復(fù)制的原理,可以控制癌細(xì)胞的增生

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B.運動強度大于c后,肌肉細(xì)胞CO2的產(chǎn)生量將大于O2消耗量

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