Question

【題目】苦蕎是一種有名的經濟植物，其含有的黃酮類化合物具有降血糖、血脂等功效。CHS是合成黃酮類化合物的關鍵酶。有人把經修飾的CHS基因導入苦蕎細胞中，培育高產黃酮苦蕎品系。按圖示回答：

（1）過程①中將修飾后的CHS基因與Ti質粒連接成重組Ti質粒的酶稱為_____________,這種酶主要有兩類，一類是從T4噬菌體中分離得到的，另一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為_______________。這兩類酶都能恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的____________________鍵。

（2）圖中將修飾后的CHS基因導入苦蕎體細胞的方法稱為__________________，除此外還可以利用的方法有________________________。對過程②操作前，需先用Ca2+處理農桿菌，使其成為___________細胞。

（3）檢測轉基因苦蕎培育是否成功，不能用抗原﹣抗體雜交技術進行檢測的原因是_______________________________________，可以比較轉基因苦蕎與普通苦蕎的_______________含量或測定細胞中CHS含量進行鑒定。

Answer 1

【答案】（1）DNA連接酶 E．coliDNA連接酶 磷酸二酯 （2）農桿菌轉化法 基因槍法、花粉管通道法 感受態(tài) （3）轉基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有黃酮類化合物 黃酮類化合物

【解析】（1）過程①中將修飾后的CHS基因與Ti質粒連接成重組Ti質粒需要DNA連接酶．這種酶主要有兩類，一類是從T4噬菌體中分離得到的，稱為T4DNA連接酶，另一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E．coliDNA連接酶．DNA連接酶連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（2）將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、花粉管通道法、基因槍法，圖中將修飾后的CHS基因導入苦蕎體細胞采用的是農桿菌轉化法．將目的基因導入微生物細胞需要采用感受態(tài)細胞法，即需先用Ca2+處理農桿菌，使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細胞。

（3）檢測轉基因苦蕎培育是否成功，不能用抗原--抗體雜交技術進行檢測，原因是轉基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有黃酮類化合物，可以比較轉基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量或測定細胞中CHS含量進行鑒定。