Question

【題目】某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混合在一起，得到混合菌。請你完成分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌的實(shí)驗(yàn)步驟，并回答有關(guān)問題：

（1）主要步驟：

①制備兩種培養(yǎng)基:一種是_____________________培養(yǎng)基，另一種加青霉素的培養(yǎng)基。分別分成兩份，依次標(biāo)上A，A′和B，B′，備用。

②分別向A、B培養(yǎng)基中接種______________________。

③接種后，放在恒溫箱中培養(yǎng)34天。

④份別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種，接種到A′、B′培養(yǎng)基中。

⑤接種后，把A′、B′培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)34天。

（2）回答問題：

在步驟①中，為保證無雜菌污染，實(shí)驗(yàn)中應(yīng)采用的主要措施有:對培養(yǎng)基進(jìn)行_____________、將_____________在酒精燈火焰上滅菌、接種過程在____________________附近進(jìn)行。在步驟④中，A培養(yǎng)基上生長良好的菌種是_____________。第④⑤兩個(gè)步驟的目的是獲得_______________________________________。

Answer 1

【答案】無氮 混合菌 高壓蒸汽滅菌 接種環(huán) 酒精燈火焰 圓褐固氮菌 純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌

【解析】

將微生物進(jìn)行分離一般采用選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長。

（1）①圓褐固氮菌是自生固氮菌，能夠在無有機(jī)氮的培養(yǎng)基上生長繁殖，而酵母菌則不能。青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁殖，但會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖。因此，將兩種微生物分離開來，需制備兩種培養(yǎng)基：一種是無氮培養(yǎng)基，另一種加青霉素的培養(yǎng)基。

②分別向A、B培養(yǎng)基中接種混合菌。

（2）在步驟①中，為保證無雜菌污染，需要進(jìn)行滅菌處理，例如培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌；接種過程在酒精燈火焰附近進(jìn)行等。

A培養(yǎng)基上無氮源，圓褐固氮菌可以生長繁殖，而酵母菌無法正常生長繁殖，故生長良好的菌種是圓褐固氮菌。

第④⑤兩個(gè)步驟是通過選擇培養(yǎng)基多次進(jìn)行選擇培養(yǎng)，目的是為了獲得純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌。