Question

【題目】毛角蛋白Ⅱ型中間絲(KIFⅡ)基因與絨山頭羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖。

(1)獲取外源基因用到的工具酶是__________，為了提高實(shí)驗(yàn)成功率，通常利用______技術(shù)獲得大量標(biāo)記的外源基因。

(2)在過程②中，用____________處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。由于人們對動(dòng)物細(xì)胞所需營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需在培養(yǎng)基中加入一定量的____________，在培養(yǎng)過程中，應(yīng)將培養(yǎng)瓶置于________培養(yǎng)。

(3)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來自____________的細(xì)胞，若要獲得多只相同的轉(zhuǎn)基因山羊，可對圖中早期胚胎進(jìn)行________后進(jìn)行胚胎移植。以上技術(shù)是在________(填“體內(nèi)”或“體外”)完成的。

(4)下列有關(guān)基因工程的敘述正確的是________。

A．切割目的基因和載體DNA時(shí)為了獲得相同的粘性末端，必須用相同的限制性核酸內(nèi)切酶。

B．用基因探針可以檢測目的基因是否表達(dá)

C．限制性核酸內(nèi)切酶的作用只是用來提取目的基因

D．重組表達(dá)載體上含有RNA聚合酶的識(shí)別結(jié)合位點(diǎn)

Answer 1

【答案】 限制性核酸內(nèi)切酶 RCR 胰蛋白酶 動(dòng)物血清 CO2培養(yǎng)箱 導(dǎo)入目的基因 胚胎分割 體外 D

【解析】試題分析：熟記并理解基因工程的基本操作程序、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植技術(shù)和胚胎工程等相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)并形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上結(jié)合題意，從題圖中提取有效信息，準(zhǔn)確定位圖中數(shù)字所示生理過程，進(jìn)而對相關(guān)問題進(jìn)行作答。

(1) 獲取外源基因（目的基因）用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶。RCR技術(shù)可以擴(kuò)增目的基因，因此欲獲得大量標(biāo)記的外源基因，可利用RCR技術(shù)。

(2) 過程②借助的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，用胰蛋白酶處理，可將羊胎兒皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)需在培養(yǎng)基中加入一定量的動(dòng)物血清，且將培養(yǎng)瓶置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以保證細(xì)胞對營養(yǎng)的需求和維持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定。

(3) 圖中重組細(xì)胞是由去核的卵母細(xì)胞與導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞的細(xì)胞核重組而成。若要獲得多只相同的轉(zhuǎn)基因山羊，可對圖中早期胚胎進(jìn)行胚胎分割后進(jìn)行胚胎移植。以上技術(shù)均是在體外完成。

(4)切割目的基因和載體DNA時(shí)為了獲得相同的粘性末端，既可以用相同的限制性核酸內(nèi)切酶，也可用不同的限制性核酸內(nèi)切酶，A項(xiàng)錯(cuò)誤；用基因探針可以檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞和檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，但不能檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)，而基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯，B項(xiàng)錯(cuò)誤；限制性核酸內(nèi)切酶的作用是用來提取目的基因和切割運(yùn)載體，C項(xiàng)錯(cuò)誤；重組表達(dá)載體的組成包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等，其中啟動(dòng)子位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，D項(xiàng)正確。