Question

【題目】科學(xué)家利用基因工程和細(xì)胞核移植技術(shù)培育了綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬�；�本流程是：從熒光水母中獲取目的基因，與有關(guān)載體重組，將其導(dǎo)入豬胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后再將成纖維細(xì)胞核植入去核的卵母細(xì)胞中，最后培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因克隆豬。

（1）成纖維細(xì)胞貼壁生長分裂到表面相互接觸時，就會停止分裂，這種現(xiàn)象叫做細(xì)胞的___________________。若將成纖維細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)，操作時首先用______________________________處理成細(xì)胞懸液。

（2）作為核移植受體細(xì)胞的去核卵母細(xì)胞一般處在____________期。供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，常通過__________（物理方法）激活重組細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。

（3）培養(yǎng)重組細(xì)胞時，將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類．?dāng)?shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為___________培養(yǎng)基，但通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的_________________________等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的主要作用是____________________。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的____________。

Answer 1

【答案】接觸抑制 蛋白酶 MⅡ中（減數(shù)第二次分裂中） 電脈沖（或電刺激） 合成 血清（或血漿） 調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH 抗生素

【解析】

1.動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2.動物細(xì)胞培養(yǎng)條件：

（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；

（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

（1）細(xì)胞貼壁生長分裂到表面相互接觸時，就會停止分裂，這種現(xiàn)象叫做細(xì)胞的接觸抑制。若將成纖維細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)，操作時首先用胰蛋白酶處理成細(xì)胞懸液。

（2）選取處在MⅡ中（減數(shù)第二次分裂中）期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞；通過電脈沖（或電刺激）激活重組細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育進(jìn)程。

（3）將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為合成培養(yǎng)基。動物細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因 子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素。