【題目】Bt基因即是蘇云金芽胞桿菌(Badcillus thuringiensis,簡稱Bt)基因,因其表達(dá)產(chǎn)物Bt毒蛋白殺蟲效果好、安全、高效等優(yōu)點(diǎn)而成為應(yīng)用最為廣泛的轉(zhuǎn)殺蟲基因.如圖為培育轉(zhuǎn)Bt基因苗的基本操作過程.
(1)Bt基因可從構(gòu)建的Bt基因組文庫中獲取,也可以從其cDNA文庫中獲取,從前者獲取的基因(填“含有”或“不含有”)啟動子.若利用PCR技術(shù)從cDNA文庫中獲取Bt基因(基因序列未知),需根據(jù)Bt蛋白氨基酸序列設(shè)計(jì)引物,引物的序列可以有多種,原因是 . 在PCR體系中需加入其中的(填“全部”或“任意1種”或“其中2種”)引物,若Bt基因序列已知,則引物的序列通常為種.
(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中,為了方便篩選含有目的基因的細(xì)胞,作為運(yùn)載體的Ti質(zhì)粒應(yīng)含有基因,其中是驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄的酶識別和結(jié)合的位點(diǎn),而能幫助目的基因整合到宿主細(xì)胞染色體上的序列稱為 . 圖示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法是
(3)步驟Ⅳ中產(chǎn)生的細(xì)胞團(tuán)稱為 , 步驟Ⅳ和Ⅴ過程要注意控制培養(yǎng)基中的濃度比例,以便獲得幼苗.

【答案】
(1)含有;一種氨基酸可能有多種密碼子,對應(yīng)生物DNA堿基序列就會有多種;全部;2
(2)標(biāo)記基因(抗性基因);啟動子;T﹣DNA(可轉(zhuǎn)移DNA);農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
(3)愈傷組織;生長素與細(xì)胞分裂素
【解析】解:(1)Bt毒蛋白基因?qū)儆谀康幕颍康幕蚩蓮幕蚪M文庫中獲取,也可從cDNA文庫中獲取,含有基因中啟動子的文庫是基因組文庫.若利用PCR技術(shù)從cDNA文庫中獲取Bt基因,需根據(jù)Bt蛋白氨基酸序列設(shè)計(jì)引物,引物的序列可以有多種,原因是一種氨基酸可能有多種密碼子,對應(yīng)生物DNA堿基序列就會有多種.在PCR體系中需加入其中的全部引物,若Bt基因序列已知,則引物的序列通常為2種.(2)標(biāo)記基因是作用是鑒別和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞;啟動子的作用是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點(diǎn),驅(qū)動轉(zhuǎn)錄;T﹣DNA的作用是幫助目的基因整合到宿主細(xì)胞染色體上;將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法.(3)步驟Ⅳ中產(chǎn)生的細(xì)胞團(tuán)稱為愈傷組織,步驟Ⅳ和Ⅴ過程要注意控制培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素的濃度比例,以便獲得幼苗. 所以答案是:(1)含有;一種氨基酸可能有多種密碼子,對應(yīng)生物DNA堿基序列就會有多種;全部;2;(2)標(biāo)記基因(抗性基因);啟動子;T﹣DNA(可轉(zhuǎn)移DNA);農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;(3)愈傷組織;生長素與細(xì)胞分裂素
【考點(diǎn)精析】解答此題的關(guān)鍵在于理解基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識,掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù).

練習(xí)冊系列答案
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(1)衰老線粒體的功能逐漸退化,會直接影響細(xì)胞的 . 細(xì)胞內(nèi)由形成一個雙膜的杯形結(jié)構(gòu),從杯口進(jìn)入,杯形結(jié)構(gòu)形成雙膜的小泡.
(2)細(xì)胞中水解酶的合成場所是 . 自噬溶酶體內(nèi)的物質(zhì)被水解后,其產(chǎn)物的去向是 . 由此推測,當(dāng)環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏時,細(xì)胞的自噬作用會(填“增強(qiáng)”、“減弱”或“不變).
(3)神經(jīng)退行性疾病是一類由于突變蛋白質(zhì)在神經(jīng)細(xì)胞中堆積而引起的神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)癥.研究發(fā)現(xiàn),提髙細(xì)胞的自噬能力能治療該類疾病,這是因?yàn)榧?xì)胞自噬能
(4)酵母菌液泡內(nèi)富含水解酶,科學(xué)家在研究液泡與自噬的關(guān)系時,以野生型酵母菌為對照組,以液泡水解酶缺陷型酵母菌為實(shí)驗(yàn)組,在饑餓狀態(tài)下,酵母菌細(xì)胞中出現(xiàn)自噬泡大量堆積現(xiàn)象.

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