Question

【題目】人的血清白蛋白在臨床上需求量很大�？茖W家培養(yǎng)出一種轉基因山羊，其膀胱上皮細胞可以合成人的血清白蛋白并分泌到尿液中。據(jù)此回答下列問題：

（1）若要體外獲得大量的人血清白蛋白基因，可采用PCR技術。該技術的前提是要根據(jù)一段已知目的基因的_____________________設計引物，而后經(jīng)過變性、復性和_______________三個步驟的循環(huán)對目的基因進行擴增。若該目的基因循環(huán)擴增4次，理論上需要消耗_________個引物。

（2）如果用山羊某個時期的____________反轉錄產(chǎn)生的多種雙鏈cDNA片段與載體連接后儲存在一個受體菌群中,這個受體菌群就叫做山羊的___________________。

（3）在構建基因表達載體過程中，一般情況下質(zhì)粒和目的基因需用________________進行切割。構建的重組質(zhì)粒上的啟動子是______________________識別和結合的部位。

（4）將重組質(zhì)粒通過_______________法導入山羊的受體細胞時，常選用受精卵作為受體細胞的主要原因是________________________________________________。

（5）人的血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮細胞中表達的原因是__________。在轉基因山羊體內(nèi)人的血清白蛋白基因只在膀胱上皮細胞中表達的優(yōu)點之一是____________________________________________。

Answer 1

【答案】核苷酸序列 延伸 30 mRNA（信使RNA） cDNA文庫(或部分基因文庫) 同種限制酶 RNA聚合酶 顯微注射 受精卵具有發(fā)育的全能性 生物界共用一套遺傳密碼子 有利于分離提取血清白蛋白（或：對山羊的干擾最�。�

【解析】

1、PCR原理：利用DNA雙鏈復制原理，將基因的核苷酸序列不斷地加以復制，使其數(shù)量呈指數(shù)方式增加。

2、基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫，其中基因組文庫包含一種生物的所有基因，而cDNA文庫中只包含該種生物部分基因。

3、基因工程最基本的工具：①基因的“剪刀”---限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱限制酶）②基因的 “針線”---DNA連接酶③基因的運載體---質(zhì)粒、噬菌體、動植物病毒等。

（1）利用PCR技術擴增目的基因的前提是，要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物；對目的基因擴增需要變性、復性和延伸三個步驟；如果該目的基因循環(huán)擴增4次，則得到16個DNA分子，32條DNA鏈，除了最初2條模板鏈上沒有引物，其余30條DNA鏈上均有引物。

（2）利用mRNA反轉錄產(chǎn)生的多種雙鏈cDNA片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中,這個受體菌群就叫做cDNA文庫(或部分基因文庫)。

（3）在構建基因表達載體過程中，一般情況下質(zhì)粒和目的基因需用同種限制酶進行切割，以形成相同的黏性末端；構建的重組質(zhì)粒上的啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位。

（4）將重組質(zhì)粒導入動物的受體細胞通過顯微注射法法；常選用受精卵作為受體細胞，主要原因是動物細胞受精卵具有發(fā)育的全能性。

（5）由于生物界共用一套遺傳密碼子，所以人的血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮細胞中表達；在轉基因山羊體內(nèi)人的血清白蛋白基因只在膀胱上皮細胞中表達的優(yōu)點之一是有利于分離提取血清白蛋白或對山羊的干擾最小。