Question

【題目】下列關(guān)于凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的敘述不正確的是

A. 在裝填凝膠色譜柱時(shí)，一旦發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)有氣泡存在，就需要重裝

B. 凝膠色譜分離蛋白質(zhì)時(shí)，大分子蛋白質(zhì)因阻力大而移動(dòng)慢，所以最后洗脫出來

C. SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳時(shí)，凝膠中加入的SDS可使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小

D. 因SDS帶負(fù)電，故電泳時(shí)應(yīng)在負(fù)極一側(cè)點(diǎn)樣

Answer 1

【答案】B

【解析】

凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是：相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動(dòng)的速度較慢。相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)的速度較快。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。電泳法是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。在測定蛋白質(zhì)分子時(shí)通常采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷的量，因而掩蓋了不同蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。

在裝填凝膠色譜柱時(shí)，凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)影響蛋白質(zhì)洗脫的次序，因此一旦發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)有氣泡存在，就需要重裝，A正確；凝膠色譜分離蛋白質(zhì)時(shí)，大分子蛋白質(zhì)因不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程短，移動(dòng)速度快，所以最先洗脫出來，B錯(cuò)誤；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳時(shí)，凝膠中加入的SDS可使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小，C正確；因SDS帶負(fù)電，故電泳時(shí)應(yīng)在負(fù)極一側(cè)點(diǎn)樣，D正確。