Question

【題目】神經(jīng)纖毛蛋白-1 (NRP-1) 是一種多功能糖蛋白，在多種腫瘤組織中呈高表達，可與血管內(nèi)皮生長因子結(jié)合促進腫瘤血管的形成，使腫瘤體積增大�？蒲腥藛T通過制備NRP-1單克隆抗體，開展對小鼠的乳腺癌腫塊進行靶向治療的研究。請分析回答：

（1）制備單克隆抗體涉及的動物細胞工程常用技術(shù)手段有_________________________(寫出兩項)。

（2）制備時，首先給小鼠注射___________________________，分離得到B細胞。將B細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合后得到雜交瘤細胞，經(jīng)系列處理選出______________________細胞注射到小鼠腹腔中，從腹水中提取到大量的NRP-1單克隆抗體。

（3）為了論證制取的單克隆抗體的治療效果，研究者選擇生長狀況一致的小鼠，分別注射等量的乳腺癌細胞懸液，經(jīng)飼養(yǎng)后，各小鼠均形成了體積基本相同的腫瘤。

①將上述小鼠隨機分成實驗組和對照組，實驗組和對照組應(yīng)分別注射____________，___________________，且每隔3天重復(fù)進行相同的注射操作，一段時間后測算發(fā)現(xiàn)，實驗組小鼠的腫瘤體積都小于對照組，原因可能是_________________________發(fā)生特異性結(jié)合，阻斷了___________________________的結(jié)合，從而抑制了腫瘤內(nèi)血管生成，導(dǎo)致腫瘤體積減小。

②上述實驗小鼠應(yīng)選用沒有___________________(器官)的動物模型鼠，由于這種鼠存在免疫缺陷，實驗時可以避免小鼠的免疫系統(tǒng)對NRP-1單克隆抗體和乳腺癌腫塊進行攻擊，從而保證實驗結(jié)果更可靠。

Answer 1

【答案】動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合 NRP-1（神經(jīng)纖毛蛋白-1） 能產(chǎn)生NRP-1抗體的雜交瘤（既能產(chǎn)生NRP-1抗體又能無限增殖的） NRP-1單克隆抗體溶液 （等量的）生理鹽水 NRP-1單克隆抗體與NRP-1 血管內(nèi)皮生長因子與NRP-1 胸腺

【解析】

單克隆抗體制備過程如下：

（1）制備單克隆抗體，需要通過動物細胞融合技術(shù)獲得雜交瘤細胞，然后通過動物細胞培養(yǎng)技術(shù)獲得單克隆抗體。

（2）制備NRP-1單克隆抗體時，首先給小鼠注射神經(jīng)纖毛蛋白-1，從小鼠脾臟分離得到B細胞，然后將B細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合后得到雜交瘤細胞，經(jīng)系列處理選出既能產(chǎn)生NRP-1抗體又能無限增殖的細胞注射到小鼠腹腔中，從腹水中提取到大量的NRP-1單克隆抗體。

（3）①驗證制取NRP-1單克隆抗體的治療效果，應(yīng)進行是否注射NRP-1單克隆抗體的對照實驗。實驗組應(yīng)注射一定生理鹽水配制的NRP-1單克隆抗體溶液，對照組應(yīng)分別注射等量的生理鹽水。實驗組小鼠的腫瘤體積都小于對照組，原因可能是NRP-1單克隆抗體與NRP-1發(fā)生特異性結(jié)合，阻斷了血管內(nèi)皮生長因子與NRP-1的結(jié)合，從而抑制了腫瘤內(nèi)血管生成，導(dǎo)致腫瘤體積減小。

②上述實驗小鼠應(yīng)選用沒有胸腺的動物模型鼠，由于這種鼠存在免疫缺陷，實驗時可以避免小鼠的免疫系統(tǒng)對NRP-1單克隆抗體和乳腺癌腫塊進行攻擊，從而保證實驗結(jié)果更可靠。