Question

【題目】為探究“某品牌酸奶中乳酸菌數(shù)量及其對(duì)抗生素耐藥性情況”，某同學(xué)進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

⑴配制的乳酸菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等主要營(yíng)養(yǎng)成分外，還應(yīng)加入適量的______和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要進(jìn)行的操作是_____________。

⑵接種微生物的方法有很多，圖1中過(guò)程③所示的方法為________。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，原因是_________________ 。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示酸奶樣品中的乳酸菌的數(shù)量(單位：個(gè)/ml)，這里的n=_______。

⑶請(qǐng)完善“檢測(cè)乳酸菌對(duì)青霉素、四環(huán)素耐藥性”的實(shí)驗(yàn)操作步驟：

步驟1:分別取______________加入三組無(wú)菌培養(yǎng)皿中，再加入滅菌并冷卻到________℃左右的培養(yǎng)基，立即混勻，靜置凝固成平板。

步驟2:向三組培養(yǎng)基中分別接種待檢測(cè)的乳酸菌菌種。

步驟3:將接種后的三組培養(yǎng)基和一個(gè)________都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)一定時(shí)間，觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長(zhǎng)情況。

Answer 1

【答案】（1）維生素 調(diào)pH

（2）稀釋涂布平板法 分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠 6

（3）等量的且適量的青霉素、四環(huán)素、無(wú)菌水 50（1分） 未接種的培養(yǎng)基

【解析】（1）配制的乳酸菌的培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等主要營(yíng)養(yǎng)成分外，還應(yīng)加人適量的維生素和瓊脂。培養(yǎng)基的制作過(guò)程是：計(jì)算-稱量-溶化-滅菌-倒平板。在溶化和滅菌之間要進(jìn)行調(diào)pH的操作。

（2）圖1過(guò)程①②是梯度稀釋，過(guò)程③是涂布平板，故過(guò)程①②③所示的方法為稀釋涂布平板法。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，原因是分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。由圖可知，該樣品是10mL，然后經(jīng)過(guò)①過(guò)程稀釋了100倍，又經(jīng)過(guò)三次②過(guò)程繼續(xù)稀釋了三次10倍，總共被稀釋了100000倍，故最后計(jì)算該樣本菌落數(shù)后，需要×100000倍×10mL=106，所以 n=6。

（3）由“檢測(cè)乳酸菌對(duì)青霉素、四環(huán)素耐藥性”這一實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍�，該�?shí)驗(yàn)的自變量是青霉素、四環(huán)素，所以在無(wú)菌培養(yǎng)皿中分別加入等量且適宜的青霉素、四環(huán)素和無(wú)菌水，其中無(wú)菌水這一組是對(duì)照組。倒平板的溫度是50°C左右。因需要檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否徹底，所以需要將一個(gè)未接種的培養(yǎng)基和上述的三組培養(yǎng)基同時(shí)置于適宜溫度下培養(yǎng)。