Question

【題目】2019年末，武漢出現(xiàn)由SARS - CoV -2病毒引發(fā)的COVID - 19肺炎，該病毒的遺傳物質(zhì)為單鏈RNA。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：

（1）間接免疫熒光法（如圖）：把冠狀病毒標(biāo)本固定在玻片上，然后將待測(cè)病人的血清滴在玻片上，特異性抗體與標(biāo)本中抗原反應(yīng)后，再加入熒光素標(biāo)記的第二抗體（與第一抗體特異性結(jié)合），洗滌后在熒光顯微鏡下觀察，若_______________，則說明待測(cè)病人為新冠肺炎患者。

（2）研究表明，從恢復(fù)期患者的血清中提取相應(yīng)抗體用于治療COVID - 19患者，其臨床狀況已有明顯改善。但是血清抗體具有___________的特點(diǎn)，因此治療用途受到限制。為此，進(jìn)行如下嘗試：

①研究組一：選用單克隆抗體技術(shù)將B淋巴細(xì)胞與骨骼瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，再用_______培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在該培養(yǎng)基上，____________的細(xì)胞和_________________的細(xì)胞都會(huì)死亡。

②研究組二：用EB病毒感染人類B淋巴細(xì)胞建立連續(xù)分裂永久生存的細(xì)胞系，所得細(xì)胞經(jīng)過稀釋后，多孔培養(yǎng)板中每個(gè)孔中細(xì)胞數(shù)量不多于______個(gè)，再進(jìn)行_________________培養(yǎng)并篩選，以便于最終得到能產(chǎn)生特異性抗體的永生化B淋巴細(xì)胞。

（3）該病引發(fā)了人們對(duì)生物武器的討論，生物武器種類包括病菌、病毒、________，和經(jīng)過基因重組的致病菌等。世衛(wèi)組織負(fù)責(zé)人多次表示，沒有任何證據(jù)表明新冠病毒是實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生。

Answer 1

【答案】出現(xiàn)熒光標(biāo)記（出現(xiàn)陽性反應(yīng)） 產(chǎn)量低、純度低、特異性差 選擇 未融合 同種（核）融合（合理給分） 1 克隆化（擴(kuò)大） 生化毒劑

【解析】

1、體液免疫過程為：（1）除少數(shù)抗原可以直接刺激B細(xì)胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細(xì)胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞，再由T細(xì)胞呈遞給B細(xì)胞；（2）B細(xì)胞接受抗原刺激后，開始進(jìn)行一系列的增殖、分化，形成記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞；（3）漿細(xì)胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應(yīng)。

2、單克隆抗體的制備

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞

①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取

3、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備。

（1）在熒光顯微鏡下，玻片有熒光顯現(xiàn)，說明病人已感染新型冠狀病毒。

（2）因?yàn)榭祻?fù)者血清中存在抗體，可以用康復(fù)者血清治療新冠型肺炎。但由于血清抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差，因此治療用途受到限制。

①單克隆抗體制備過程中，將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后需要采用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行第一次篩選，通過選擇培養(yǎng)的篩選，未融合的細(xì)胞和同種（核）融合的細(xì)胞不能生長(zhǎng)繁殖，會(huì)死亡。

②進(jìn)行克隆化培養(yǎng)過程中，利用多孔培養(yǎng)板對(duì)細(xì)胞進(jìn)行稀釋時(shí)，每個(gè)孔中的細(xì)胞數(shù)量不多于1個(gè)，再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)并抗體陽性篩選。

（3）生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。