Question

5．某研究小組進行藥物試驗時，以動物細胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性．供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種，甲為骨髓瘤細胞，乙為經(jīng)免疫過的正常漿細胞．請答題：
（1）將數(shù)量相等的甲和乙分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同且適宜．一段時間后，觀察到的現(xiàn)象是甲增多，乙不增多．
（2）動物細胞培養(yǎng)需要滿足一定的條件，下列有關表述正確的有①②（選擇填寫下列條件前的序號）．
①對培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進行無菌處理，在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液，這些做法都有利于提供一個無菌無毒的培養(yǎng)環(huán)境
②在使用合成培養(yǎng)基時，通常需加入血漿等天然成分
③所有動物細胞培養(yǎng)的適宜溫度均為36.5±0.5℃，多數(shù)哺乳動物細胞生存的適宜pH為7.0左右
④動物細胞培養(yǎng)所需的氣體只是O₂，因為O₂是細胞代謝所必需
⑤培養(yǎng)液中需添加一定濃度和比例的生長素與細胞分裂素，以誘導細胞脫分化和再分化
（3）藥物試驗需要大量細胞，甲乙看來都不適合用于試藥，理由是：甲有部分基因已經(jīng)發(fā)生了變異，藥物對甲的效果不一定與正常體細胞的效果相同，乙在體外培養(yǎng)不能增殖，不能得到大量細胞用于試藥．．
（4）令甲乙細胞融合，所獲雜交細胞在體外培養(yǎng)條件下，具有既能增殖，又能產(chǎn)生專一抗體的特點．
（5）已知癌細胞中X基因過量表達與骨髓瘤的發(fā)生密切相關．要試驗一種抗腫瘤藥物Y對甲生長的影響，可將甲分為A、B兩組，A組細胞培養(yǎng)液中加入Y，B組細胞培養(yǎng)液中加入無菌生理鹽水，在相同且適宜條件下培養(yǎng)一定時間后，從A、B兩組收集等量細胞，通過分別檢測X基因在A、B兩組細胞中的合成mRNA和蛋白質水平的差異，以確定Y的藥效．

Answer 1

分析 1、動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
2、動物細胞培養(yǎng)的條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質．
（3）溫度和PH．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．

解答 解：（1）已知甲細胞為骨髓瘤細胞，乙正常細胞為漿細胞．將數(shù)量相等的甲和乙分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同且適宜．一段時間后，觀察到的現(xiàn)象是甲增多，乙不增多．
（2）解：①對培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進行無菌處理，在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液，這些做法都有利于提供一個無菌無毒的培養(yǎng)環(huán)境，①正確；
②在使用合成培養(yǎng)基時，通常需加入血漿等天然成分，②正確；
③細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度和動物體溫相近，哺乳動物動物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)動物細胞生存的適宜pH為7.2-7.4，③錯誤；
④動物細胞培養(yǎng)所需的氣體主要有氧氣和二氧化碳，O₂是細胞代謝所必需，二氧化碳主要維持培養(yǎng)液的PH．④錯誤；
⑤動物細胞培養(yǎng)，不需要添加植物激素，⑤錯誤．
故選：①②．
（3）藥物試驗需要大量細胞，甲乙看來都不適合用于試藥，因為甲有部分基因已經(jīng)發(fā)生了變異，藥物對甲的效果不一定與正常體細胞的效果相同，乙在體外培養(yǎng)不能增殖，不能得到大量細胞用于試藥．
（4）甲乙細胞融合，所獲雜交細胞在體外培養(yǎng)條件下，具有既能增殖，又能產(chǎn)生專一抗體的特點．
（5）該實驗的目的是試驗一種抗腫瘤藥物Y對甲細胞生長的影響，因此自變量為是否加入Y，B組細胞培養(yǎng)液中加入等量無菌生理鹽水，則A組細胞培養(yǎng)液中應加入等量Y．已知基因X表達與肝腫瘤的發(fā)生密切相關，而基因X的表達包括轉錄和翻譯兩個步驟，抗癌藥物Y的作用可能是抑制基因X的轉錄過程，也可能是抑制其翻譯過程，因此通過分別檢測基因X在A、B兩組細胞中的mRNA或相關蛋白質合成水平的差異，可以確定Y的藥效．
故答案為：
（1）甲增多，乙不增多
（2）①②
（3）甲有部分基因已經(jīng)發(fā)生了變異，藥物對甲的效果不一定與正常體細胞的效果相同，乙在體外培養(yǎng)不能增殖，不能得到大量細胞用于試藥
（4）既能增殖，又能產(chǎn)生專一抗體的特點
（5）Y  mRNA和蛋白質

點評 題以藥物試驗為背景，考查癌細胞的主要特征、動物細胞培養(yǎng)、探究實驗，要求考生識記動物細胞培養(yǎng)的過程及動物細胞培養(yǎng)的條件；識記癌細胞的主要特征；明確實驗的目的，理解實驗的原則，能結合轉錄和翻譯的過程答題．