【題目】研究發(fā)現(xiàn),PVYCP基因位于某種環(huán)狀 DNA 分子中。將 PVYCP 基因?qū)腭R鈴薯, 使之表達(dá)即可獲得抗 PVY 病毒的馬鈴薯。 圖表示 PVYCP 重組質(zhì)粒的構(gòu)建過(guò)程,相關(guān)酶切位點(diǎn)如下表。

1)步驟選用的 klenow 酶與細(xì)胞內(nèi)的__(填酶的名稱(chēng))的功能相似。步驟應(yīng)選用的限制性核酸內(nèi)切酶是__________。

2)若 BamHⅠ酶切的 DNA 末端與 BglⅡ酶切的 DNA 末端連接,連接部位的 6 個(gè)堿基對(duì)序列為_________,對(duì)于該部位,這兩種酶_________(填都能、都不能只有一種能)切開(kāi)。

3)若用 Sau3AⅠ切圖中所示的質(zhì)粒(多個(gè)),最多可能獲得_____________種大小不同的 DNA 片段。

4)步驟獲得的重組質(zhì)粒通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入馬鈴薯的原生質(zhì)體,并誘導(dǎo)形成細(xì)胞壁,再轉(zhuǎn)入_________ A、細(xì)胞分裂素多,生長(zhǎng)素少 B、細(xì)胞分裂素少,生長(zhǎng)素多 C、細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素比例適合 D、細(xì)胞分裂素中等,生長(zhǎng)素少)的培養(yǎng)基中培養(yǎng),形成__,再進(jìn)行生根培養(yǎng),獲得轉(zhuǎn)基因馬鈴薯。

5)可用__的方法,從個(gè)體水平檢測(cè)馬鈴薯植株中 PVYCP 基因是否成功表達(dá)。

【答案】DNA聚合酶 BglⅡ和Sma 都不能 7 A 叢狀苗 PVY病毒感染

【解析】

基因工程的操作步驟:獲取目的基因(基因文庫(kù)、PCR、人工合成);構(gòu)建基因表達(dá)載體(含標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、目的基因、復(fù)制原點(diǎn)等);把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法、鈣離子處理法);目的基因的檢測(cè)和鑒定(分子水平和個(gè)體水平檢測(cè),前者包括DNA分子雜交、分子雜交和抗原抗體雜交;后者如抗蟲(chóng)抗病接種實(shí)驗(yàn))。

1)步驟②選用的 klenow 酶可以催化脫氧核苷酸結(jié)合形成磷酸二酯鍵,類(lèi)似于細(xì)胞內(nèi)DNA聚合酶。經(jīng)步驟③處理后,目的基因一端的黏性末端為-GATC,一端為平末端,故選擇限制酶對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割時(shí),應(yīng)該選擇SmaⅠ產(chǎn)生平末端,另外需要選擇一種可以產(chǎn)生-GATC黏性末端的限制酶進(jìn)行切割,結(jié)合轉(zhuǎn)錄的方向可知,應(yīng)該選擇BglⅡ,故需要選擇BglⅡSmaⅠ對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割。

2BamHⅠ識(shí)別的序列為GGATCCBglⅡ識(shí)別序列為AGATCT,二者切割的末端均為-GATC,二者產(chǎn)生的黏性末端經(jīng)DNA連接酶處理后,連接的產(chǎn)物為。

兩種酶均不能識(shí)別重新連接的產(chǎn)物,故均不能對(duì)其進(jìn)行切割。

3Sau3AⅠ的識(shí)別序列為GATC,圖中質(zhì)粒含有3個(gè)Sau3AⅠ的識(shí)別位點(diǎn),用其進(jìn)行切割可能打開(kāi)1個(gè)切口、2個(gè)切口或3個(gè)切口,計(jì)算可知,Sau3AⅠ切割后最多可能獲得7種大小不同的 DNA 片段。

4)步驟⑤獲得的重組質(zhì)粒通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入馬鈴薯的原生質(zhì)體,并誘導(dǎo)形成細(xì)胞壁,需要進(jìn)行組織培養(yǎng),先轉(zhuǎn)入A、細(xì)胞分裂素(利于芽的形成)多,生長(zhǎng)素少的培養(yǎng)基中培養(yǎng),形成叢狀苗,再進(jìn)行生根培養(yǎng),獲得轉(zhuǎn)基因馬鈴薯。

5)可用PVY病毒感染馬鈴薯,觀察馬鈴薯是否患病,從個(gè)體水平檢測(cè)馬鈴薯植株中 PVYCP 基因是否成功表達(dá)。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下圖是“噬菌體侵染大腸桿菌”實(shí)驗(yàn),其中親代噬菌體已用32P標(biāo)記,A.C中的方框代表大腸桿菌。下列關(guān)于本實(shí)驗(yàn)的敘述不正確的是( )

A. 圖中錐形瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液是用來(lái)培養(yǎng)大腸桿菌的,其營(yíng)養(yǎng)成分中的P應(yīng)含32P標(biāo)記

B. 若要達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康�,還要再設(shè)計(jì)一組用35S標(biāo)記噬菌體進(jìn)行的實(shí)驗(yàn),兩組相互對(duì)照

C. 圖中若只有C中含大量放射性,可直接證明的是噬菌體的DNA侵入了大腸桿菌

D. 實(shí)驗(yàn)中B對(duì)應(yīng)部分有少量放射性,可能原因是實(shí)驗(yàn)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),部分細(xì)菌裂解

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下圖為某同學(xué)在模擬孟德?tīng)栯s交實(shí)驗(yàn)活動(dòng)時(shí)的材料用具,對(duì)該模擬活動(dòng)的有關(guān)敘述正確的是

A. 中小球數(shù)量相同,表示產(chǎn)生的雌雄配子數(shù)量相等

B. 中隨機(jī)抓取一個(gè)小球并組合模擬雌雄配子受精

C. 、、、中各取1個(gè)小球組合,組合類(lèi)型有9

D. 每次取出小球后需要放回小桶內(nèi),是為了保證每次取小球的隨機(jī)性

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】圖是甲(致病基因用A或 a 表示)、乙(致病基因用B或 b 表示)兩種單基因遺傳病的家系圖。家系中無(wú)突變發(fā)生且其中一種病為伴性遺傳,相關(guān)基因不位于Y染色體上。已知正常人群中乙病攜帶者占 1/6。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A. 甲病為伴 X 染色體隱性遺傳病,乙病為常染色體隱性遺傳病

B. 11 號(hào)與 13 號(hào)個(gè)體的基因型相同的概率為 5/9

C. 10 13 號(hào)個(gè)體結(jié)婚,生育一個(gè)只患一種病后代的概率是 17/48

D. 12 號(hào)個(gè)體與人群中正常男性結(jié)婚,生育一個(gè)兩病兼患的男孩的概率是 1/32

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】1972 年桑格和尼克森提出的流動(dòng)鑲嵌模型普遍為人們所接受,它能很好地解釋生物 膜的動(dòng)態(tài)功能,如圖是細(xì)胞膜的模式圖,以下有關(guān)說(shuō)法正確的是(

A.物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞與②有關(guān),與③無(wú)關(guān)

B.生物膜上的②不能運(yùn)動(dòng),③構(gòu)成了生物膜的基本支架

C.生物膜上的①可以具有識(shí)別、保護(hù)和潤(rùn)滑等作用

D.制作的生物膜流動(dòng)鑲嵌模型和 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)模型都是概念模型

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】圖①表示葡萄糖、Na O2 進(jìn)出肝細(xì)胞的方式,圖②、圖③表示這些物質(zhì)進(jìn)出該細(xì)胞 時(shí),載體數(shù)量或 O2 濃度與運(yùn)輸速度的關(guān)系。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(

A.葡萄糖進(jìn)入該細(xì)胞的運(yùn)輸速度符合圖②和圖③

B.Na運(yùn)出該細(xì)胞的速度符合圖②,不符合圖③

C.O2 進(jìn)入該細(xì)胞不符合②,符合③

D.不同物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞膜的速率可以不同

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】線粒體不僅是細(xì)胞的能量工廠,也在細(xì)胞凋亡的調(diào)控中起重要作用,如下圖所示。

1)線粒體中的細(xì)胞色素c嵌入在線粒體內(nèi)膜的______中,參與有氧呼吸第_____階段的反應(yīng)。

2)當(dāng)紫外線、DNA損傷、化學(xué)因素等導(dǎo)致細(xì)胞損傷時(shí),線粒體外膜的_發(fā)生改變,線粒體膜兩側(cè)的離子分布發(fā)生變化,導(dǎo)致線粒體膜電位下降或消失,細(xì)胞色素c被釋放到_____中,與蛋白A結(jié)合,在ATP的作用下,使_____,引起細(xì)胞凋亡。

3)活化的C-3酶可作用于線粒體,加速細(xì)胞色素c的釋放,從而加速細(xì)胞的凋亡,這是一種____________調(diào)節(jié)機(jī)制。

4)細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的程序性死亡,凋亡細(xì)胞解體后被吞噬細(xì)胞吞噬,由吞噬細(xì)胞內(nèi)的____________將其消化。

5)為研究另一種蛋白B對(duì)家蠶細(xì)胞凋亡的影響,科研人員先做了如下實(shí)驗(yàn)。用生物堿H處理懸浮培養(yǎng)的家蠶正常細(xì)胞,處理不同時(shí)間后,用凝膠電泳方法測(cè)定不同位置中細(xì)胞色素c的含量,結(jié)果如下圖所示。

①由于細(xì)胞中微管蛋白的表達(dá)量_________,在實(shí)驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),以校準(zhǔn)和消除由于細(xì)胞培養(yǎng)操作、細(xì)胞取樣量和細(xì)胞色素c_________等無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

②據(jù)圖分析,正常細(xì)胞的細(xì)胞溶膠中_________檢測(cè)到細(xì)胞色素c。

③隨著生物堿H處理時(shí)間延長(zhǎng),線粒體中的細(xì)胞色素c逐漸釋放到細(xì)胞溶膠中,依據(jù)是_________。

6)為確定蛋白B的功能,科研人員構(gòu)建蛋白B基因過(guò)量表達(dá)載體和蛋白B基因表達(dá)干擾載體,獲得兩組轉(zhuǎn)基因家蠶細(xì)胞。用_____處理懸浮培養(yǎng)的兩組轉(zhuǎn)基因家蠶細(xì)胞,檢測(cè)到過(guò)量表達(dá)蛋白B的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的含量減少,抑制蛋白B基因表達(dá)的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的含量顯著增加,推測(cè)蛋白B對(duì)細(xì)胞凋亡的影響機(jī)理是______。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】如圖是某研究小組在探究酵母菌的細(xì)胞呼吸方式時(shí)的兩套實(shí)驗(yàn)裝置圖,下列分析合理的是

A. 為檢驗(yàn)空氣中的二氧化碳是否被A瓶完全吸收,可在B瓶前加一個(gè)盛有澄清石灰水的錐形瓶

B. 實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)C瓶先變混濁后又澄清了,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)不成功

C. 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行一段時(shí)間后用酸性的重鉻酸鉀檢測(cè)E瓶中物質(zhì)會(huì)出現(xiàn)灰綠色

D. D瓶封口后應(yīng)立即接通E瓶,防止D瓶中的培養(yǎng)液被分解完

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】在人類(lèi)遺傳病調(diào)查中發(fā)現(xiàn)某兩個(gè)家系中都有甲遺傳�。ɑ�?yàn)?/span> A/a)和乙遺傳�。ɑ�?yàn)?/span> B/b)患者,兩家系的遺傳系譜圖如圖所示,其中1 不攜帶乙病的致病基因。下列敘述錯(cuò)誤的是

A. 甲病為常染色體隱性遺傳病,乙病為伴 X染色體隱性遺傳病

B. 1 2 個(gè)體的基因型依次為 AaXBY、AaXBXb

C. 2 的性染色體組成為 XXY,則是由母方減數(shù)第一次分裂異常所致

D. 5 6 結(jié)婚,則所生孩子只患乙病的概率為 1/9

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同步練習(xí)冊(cè)答案
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