Question

15．如表是幾種限制酶識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，如圖為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的技術(shù)流程，請(qǐng)據(jù)圖回答：

限制酶	BamHⅠ	BfuCⅠ	XmaⅠ	SmaⅠ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)	G↓GATCC	↓GATC	C↓CCGGG	CCC↓GGG

（1）依據(jù)表中四種酶切割位點(diǎn)，會(huì)形成相同末端的是BamHⅠ和 BfuCⅠ，從不同酶的識(shí)別序列上看，限制酶的作用特點(diǎn)是能識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定位點(diǎn)切割雙鏈DNA．
（2）根據(jù)表中酶切位點(diǎn)，請(qǐng)寫出BamHⅠ切割后形成的末端：．
（3）圖中過程①中涉及的酶是限制酶和DNA連接酶，該過程是基因工程的核心步驟，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并能遺傳給下一代，同時(shí)能表達(dá)并發(fā)揮作用．
（4）圖中過程②最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，檢測(cè)抗蟲基因是否整合到棉花細(xì)胞DNA分子上的方法是DNA分子雜交技術(shù)．
（5）經(jīng)檢測(cè)抗蟲棉細(xì)胞染色體上含有一個(gè)抗蟲基因，該植株自交得到F_l，其中全部的抗蟲植株再自交一次，后代中抗蟲植株占總數(shù)的$\frac{5}{6}$．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：①是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程，③是脫分化過程，④是再分化過程．
基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�。虎诨�因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定．

解答 解：（1）依據(jù)表中四種酶切割位點(diǎn)，會(huì)形成相同末端的是BamHⅠ和BfuCⅠ，產(chǎn)生的末端都是-GATC-；從不同酶的識(shí)別序列上看，說(shuō)明限制酶具有能識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定位點(diǎn)切割雙鏈DNA的作用特點(diǎn)．
（2）根據(jù)表中酶切位點(diǎn)，BamHⅠ切割后形成的末端是．
（3）在基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中，涉及的酶是限制酶和DNA連接酶，該過程是基因工程的核心步驟，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并能遺傳給下一代，同時(shí)能表達(dá)并發(fā)揮作用．
（4）圖中過程②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；檢測(cè)抗蟲基因是否整合到棉花細(xì)胞DNA分子上的方法是DNA分子雜交技術(shù)．
（5）抗蟲棉細(xì)胞染色體上含有一個(gè)抗蟲基因（用A表示），那么該植株可看做是雜合子（Aa），自交得到的F_l有三種基因型（AA、Aa、aa），如果其中全部的抗蟲植株（$\frac{1}{3}$AA、$\frac{2}{3}$Aa）再自交一次，那么后代中不抗蟲植株占$\frac{2}{3}×\frac{1}{4}$=$\frac{1}{6}$，抗蟲植株占1-$\frac{1}{6}$=$\frac{5}{6}$．
故答案為：
（1）BamHⅠ和BfuCⅠ能識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定位點(diǎn)切割雙鏈DNA．
（2）
（3）限制酶和DNA連接酶     使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并能遺傳給下一代，同時(shí)能表達(dá)并發(fā)揮作用
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法                   DNA分子雜交技術(shù)
（5）$\frac{5}{6}$

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．