Question

如圖是從酵母菌中獲取某植物需要的某種酶的基因的流程，結(jié)合所學(xué)知識(shí)及相關(guān)信息回答下列問題：
（1）圖中cDNA文庫(kù)

 

基因組文庫(kù)（大于、等于、小于）．
（2）①過程提取的DNA需要

 

的切割，B過程是

 

過程．
（3）為在短時(shí)間內(nèi)大量獲得目的基因，可用的技術(shù)是

 

，其原理

 

．
（4）目的基因獲取之后，需要構(gòu)建基因表達(dá)的載體，其組成必須有

 

及標(biāo)記基因等，此步驟是基因工程的核心．
（5）將該目的基因?qū)�入某雙子葉植物細(xì)胞，常采用的方法是

 

，其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是

 

，可以用

 

技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、基因文庫(kù)是指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入到受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因．包括基因組文庫(kù)（包含某種生物所有的基因）和部分基因文庫(kù)（包含某種生物的部分基因，如cDNA文庫(kù)）．
2、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（適用于目的基因的核苷酸序列已知的情況）．PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，其原理是DNA復(fù)制，需要模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），以指數(shù)的方式擴(kuò)增，即約2n．
3、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用．基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因．
4、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，如受體細(xì)胞是植物細(xì)胞，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是用這種方法獲得的），具體過程：目的基因插人Ti質(zhì)粒的T-DNA上

導(dǎo)入

農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→目的基因整合到植物細(xì)胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)．另外，還可用基因槍法和花粉管通道法；如果受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，常用顯微注射技術(shù)；如果受體細(xì)胞是微生物細(xì)胞，用Ca2+處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合（在緩沖液中）→一定溫度下，感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化．

解答： 解：（1）基因組文庫(kù)包含某種生物所有的基因．部分基因文庫(kù)包含某種生物的部分基因．如：cDNA文庫(kù)．
（2）①過程是獲取目的基因，需要限制酶切割．B過程是有mRNA獲取DNA過程，是反轉(zhuǎn)錄過程．
（3）PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，其原理是DNA復(fù)制．
（4）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用．基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因．
（5）受體細(xì)胞是雙子葉植物，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因轉(zhuǎn)入到受體細(xì)胞中，利用農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上功能，能否轉(zhuǎn)化成功，還需要用DNA分子雜交技術(shù)對(duì)受體細(xì)胞中DNA進(jìn)行檢測(cè)．
故答案為：
（1）小于
（2）限制酶           反轉(zhuǎn)錄
（3）PCR技術(shù)          DNA復(fù)制
（4）啟動(dòng)子、終止子、目的基因（復(fù)制原點(diǎn)可不答）
（5）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    目的基因是否整合到植物細(xì)胞的染色體上     DNA分子雜交

點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程過程和應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問題的能力和從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力．