Question

【題目】果汁制作是常用的水果加工技術(shù)之一，不僅可以緩解產(chǎn)銷矛盾，而且能夠提高產(chǎn)品的附加值。由霉菌發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一 ，被廣泛地應(yīng)用于果汁加工業(yè)。下圖為從黑曲霉菌中提取果膠酶的流程圖�；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：

（1）生產(chǎn)果汁時(shí)，為了使果膠酶得到充分的利用，除了控制好溫度和pH外，還需要控制好______。

（2）圖中步驟A為________，該步驟常采用透析法，目的是___________________。

（3）蛋白質(zhì)純化可采用凝膠色譜法分離相應(yīng)蛋白質(zhì)，其分離依據(jù)是____________。凝膠色譜柱的裝填要注意不得有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)_______。 純化的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求，需要進(jìn)行蛋白質(zhì)純度的鑒定，使用最多的鑒定方法是____________。

（4）為了使酶能夠被重復(fù)利用，節(jié)約成本，可將果膠酶進(jìn)行固定化。一般來說，酶不適合采用包埋法進(jìn)行固定，分析其原因是_______。上圖甲 、乙分別為MCM-48用量及果膠酶濃度對果膠酶固定效果的影響，據(jù)圖可知，固定化果膠酶較適宜的條件是___________________。

Answer 1

【答案】果膠酶的用量(或酶的用量) 粗分離 去除樣品中(分子量較小)的雜質(zhì) 蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小 攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 酶分子小，容易從包埋材料中漏出 MCM-48用量0．05g、果膠酶濃度0． 5mg/mL

【解析】

由題圖可知，圖甲表示MCM-48用量與果膠酶吸附量的關(guān)系，在0-0.05g中，MCM-48用量越多，果膠酶吸附量越多，超過0.05g后，MCM-48用量越多，果膠酶吸附量越少；圖乙表示果膠酶濃度與果膠酶吸附量的關(guān)系，0-0.5mg/ml中，果膠酶吸附量隨果膠酶用量增加而增加，在0.5mg/ml之后，果膠酶增加，果膠酶吸附量不再增加，達(dá)到吸附上限。

（1）為了使果膠酶得到充分利用，除控制好溫度和pH外，還需要控制果膠酶的用量，避免造成浪費(fèi)；

（2）圖中步驟A在樣品處理之后純化之前，為粗分離過程；常采用透析法，目的是除樣品中分子量較小的雜質(zhì)；

（3）用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小；凝膠色譜柱中的氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果；鑒定蛋白質(zhì)純度的最常用方法是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳；

（4）酶由于分子小，使用包埋法容易從包埋材料中漏出；分析圖甲與圖乙中的轉(zhuǎn)折點(diǎn)可知，MCM-48用量0．05g、果膠酶濃度0．5mg/mL為固化果膠酶較適宜的條件。