Question

19．用于植物遺傳轉(zhuǎn)化的方法主要為載體法和非載體法．載體法是以農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒和Ri質(zhì)粒為介導(dǎo)的方法，適用于雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物的遺傳轉(zhuǎn)化．非載體法是通過各種物理和化學(xué)等手段，將DNA直接導(dǎo)入受體細(xì)胞進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化，主要包括基因槍法、PEG法、電激法、脂質(zhì)體法、顯微注射法、激光微束法、超聲波法、碳化硅纖維法、電離子透入法及花粉管通道法等．

Answer 1

分析 按照基因引入受體植物細(xì)胞的方法，植物遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)大體可分為兩類：以載體為媒介的基因轉(zhuǎn)移和基因或DNA的直接轉(zhuǎn)移．
（一）載體法轉(zhuǎn)化：一種是以植物原生質(zhì)為受體的共培養(yǎng)法；一種是葉盤法．
共培養(yǎng)法是把農(nóng)桿菌與植物原生質(zhì)體共同培養(yǎng)以實現(xiàn)轉(zhuǎn)化的方法．其程序包括農(nóng)桿菌對初生細(xì)胞壁的原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選和誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化細(xì)胞分化并再
除上述以Ti質(zhì)粒為載體的基因轉(zhuǎn)化外，還可以用脂質(zhì)體（liposome）為載體進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化．脂質(zhì)體是由磷脂組成的膜狀結(jié)構(gòu)，因此可將DNA分子包裝在脂質(zhì)體內(nèi)以避免受體細(xì)胞DNase的降解，把DNA分子導(dǎo)入到植物的原生質(zhì)體中去．
（二）基因直接轉(zhuǎn)移的方法
1．電激和電注射法：通過高壓電脈沖的電激穿孔作用把外源DNA引入植物原生質(zhì)體的方法就稱為電激法．這種方法現(xiàn)已較廣泛地應(yīng)用于單子葉和雙子葉植物以及動物的基因轉(zhuǎn)移，如20世紀(jì)80年代末用此法將新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶（NPTⅡ）基因轉(zhuǎn)入玉米自交系的原生質(zhì)體，已再生成植株．通過電激技術(shù)把基因直接引入完整的植物細(xì)胞或組織的方法，稱作電注射．這種方法可避免原生質(zhì)體培養(yǎng)和再生成植株的繁雜操作與困難，因而具有巨大的應(yīng)用潛力．
2．基因槍法 基因槍法又稱粒子轟擊技術(shù)．這一方法是用粒子槍把表面吸附有外源DNA的金屬微粒高速地射進(jìn)植物細(xì)胞或組織．由于此法快速簡便，不受宿主范圍限制，而受體植物細(xì)胞不需去除細(xì)胞壁，轉(zhuǎn)化率又高，被轉(zhuǎn)化的細(xì)胞或組織容易再生成植株，因而頗受關(guān)注．
3．微注射法 微注射是利用顯微注射儀等，通過機械的方法將外源基因或DNA直接注入細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)．與其他方法相比，這個方法對外源遺傳物質(zhì)的導(dǎo)入更為直接和有效．

解答 解：用于植物遺傳轉(zhuǎn)化的方法主要為載體法和非載體法．載體法是以農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒和Ri質(zhì)粒為介導(dǎo)的方法，適用于雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物的遺傳轉(zhuǎn)化．非載體法是通過各種物理和化學(xué)等手段，將DNA直接導(dǎo)入受體細(xì)胞進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化，主要包括基因槍法、PEG法、電激法、脂質(zhì)體法、顯微注射法、激光微束法、超聲波法、碳化硅纖維法、電離子透入法及花粉管通道法等．
故答案為：農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒    Ri質(zhì)粒    雙子葉植物    少數(shù)單子葉植物    物理和化學(xué)    DNA     基因槍法、PEG法、電激法、脂質(zhì)體法、顯微注射法、激光微束法、超聲波法、碳化硅纖維法、電離子透入法及花粉管通道法等

點評 本題基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理，掌握基因工程的操作步驟及各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．