Question

【題目】請回答與“固定化酶”實驗有關的問題：

(1)—淀粉酶可以通過培養(yǎng)枯草桿菌來生產，_______是篩選高表達量菌株的最簡便方法之一。篩選出的菌株在發(fā)酵生產之前還需利用__________培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)。

(2)利用物理或化學的方法將—淀粉酶固定后，成為_______且又有酶活性的制劑。若用吸附法固定時，在裝柱后需要用_________緩慢沖洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液發(fā)生___________為止。

(3)將淀粉溶液以一定流速從反應柱上端滴入，再在下端接取少量流出液進行KI-I2顏色測試，結果不呈現(xiàn)紅色。對此現(xiàn)象的解釋錯誤的是___________

A．反應柱中沒有—淀粉酶被固定

B．流速過快淀粉未被水解

C．接取的流出液是蒸餾水

D．流速過慢淀粉被水解成葡萄糖

Answer 1

【答案】 單菌落分離 液體 不溶于水 10倍體積蒸餾水 褪色 D

【解析】試題分析：固定化酶是指用物理學或化學的方法將酶與固相載體結合在一起形成的仍具有酶活性的酶復合物。在催化反應中，它以固相狀態(tài)作用于底物，反應完成后，容易與水溶性反應物和產物分離，可被反復使用。

（1）單菌落的分離是篩選高表達菌株的最簡便方法之一；篩選出的菌株在發(fā)酵生產之前還需利用液體培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)。

（2）—淀粉酶在水溶液中很不穩(wěn)定，且不利于工業(yè)化使用，常用固定化技術使之成為不溶性于水而又有酶活性的制劑。若用吸附法固定時，在裝柱后需要用蒸餾水緩慢沖洗，所用的蒸餾水體積為裝填體積的10倍，直至流出液不使淀粉-碘混合液發(fā)生褪色為止。

（3）根據(jù)題干信息分析，將淀粉溶液以一定流速從反應柱上端滴入，再在下端接取少量流出液進行KI-I2顏色測試，結果不呈現(xiàn)紅色，說明仍然有淀粉存在，可能是由于反應柱中沒有—淀粉酶被固定，導致淀粉沒有被水解，A正確；也可能是流速過快，導致淀粉未被水解，B正確；也可能接取的流出液是蒸餾水，C正確；淀粉溶液經過α‐淀粉酶后的水解產物是糊精，不是葡萄糖，D錯誤。